BD, 550071, BD Pharmingen™ IL-6 humana recombinante

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, la IL-6 humana recombinante (n.º de cat. 550071) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 a 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 0,5 a 1,0 mg/ml. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 a 10 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede producirse una pérdida de actividad. Las proteínas transportadoras deben examinarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a la toxicidad, los altos niveles de endotoxina o la posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: La IL-6 humana recombinante (n.° de cat. 550071) puede ser útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína IL-6 humana mediante ELISA tipo sándwich con el anticuerpo MQ2-13A5 purificado (n.° de cat. 554543) como anticuerpo de captura y MQ2-39C3 biotinilado (n.° de cat. 554546) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se recomienda incluir en cada placa ELISA diluciones dobles de IL-6 humana recombinante de 2000 a 15 pg/mL. Para medir la IL-6 humana en suero o plasma, se recomienda encarecidamente el uso del kit BD OptEIA™ Human IL-6 ELISA Set (n.° de cat. 555220) o el kit BD OptEIA™ Human IL-6 ELISA Kit II (n.° de cat. 550799). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de Bioensayo no se prueba rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente que titulen este material e incluyan controles apropiados en los experimentos relevantes. Se ha informado previamente un rango de actividad de 0,5-3,0x10^8 unidades/mg, que abarca una ED50 = 30-200 pg/mL, utilizando TF-1 como células indicadoras para la proliferación, con una unidad definida como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima en la saturación de citocinas. Bloqueo: La IL-6 humana recombinante (Cat. No. 550071) puede ser útil como control de bloqueo para el análisis de citometría de flujo cuando se utiliza con anticuerpos MQ2-13A5 conjugados con FITC o PE (Cat. No. 554544 o 554545), o anticuerpos MQ2-6A3 conjugados con FITC o PE (Cat. No. 554696 o 554697). Se informa a los investigadores que la aplicación de bloqueo no se analiza rutinariamente para este material. Las técnicas de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo se describen detalladamente por C. Prussin y D. Metcalfe.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.