BD, 554618, BD Pharmingen™ TNF humano recombinante

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, el TNF humano recombinante (n.º de cat. 554618) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5-10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de ≥ 1 mg/mL. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5-10 mg/mL. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede producirse una pérdida de actividad. Las proteínas transportadoras deben examinarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a la toxicidad, los altos niveles de endotoxina o la posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: El TNF humano recombinante (n.° de cat. 554618) puede ser útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína TNF humano mediante ELISA tipo sándwich con el anticuerpo MAb1 purificado (n.° de cat. 551220) como anticuerpo de captura y el anticuerpo MAb11 biotinilado (n.° de cat. 554511) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se recomienda incluir en cada placa ELISA diluciones dobles del estándar de TNF humano recombinante de 2000 a 15 pg/mL. Para medir el TNF humano en suero o plasma, se recomienda encarecidamente el uso del kit ELISA BD OptEIA™ Human TNF (n.° de cat. 555212) o el kit ELISA BD OptEIA™ Human TNF II (n.° de cat. 550610). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de bioensayo no se analiza rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente titularlo e incluir controles adecuados en los experimentos pertinentes. Se ha reportado previamente un rango de actividad de 0,05 a 2,0 x 10^9 unidades/mg, con una DE50 de 5 a 200 pg/mL, utilizando células indicadoras L929 en un ensayo de citólisis. La unidad se define como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima a la saturación de citocinas.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.