BD, 560071, antígeno purificado de ratón anti-TRA-1-60 humano de BD Pharmingen™

Nombre alternativo: TRA-1-60(R)
Reactividad: Humana (Prueba de control de calidad), Rh (Reportada)
Isotipo: IgM BALB/c de ratón, κ
Inmunógeno: Línea celular de carcinoma embrionario humano
Aplicación: Western blot (probado rutinariamente), bioimagen (probado durante el desarrollo), citometría de flujo, inmunoprecipitación, radioinmunoensayo (reportado)
Peso molecular objetivo: Múltiple, >200 kDa
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_1645604
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Bioimagen: 1. Siembre las células en un medio de cultivo apropiado a una densidad celular apropiada en una placa de imágenes BD Falcon™ de 96 pocillos (n.º de cat. 353219) y cultive durante la noche a 48 horas. 2. Retire el medio de cultivo de los pocillos, lave los pocillos dos veces con 100 μl de PBS 1× y fije las células añadiendo 100 µl de formaldehído fresco al 3,7 % en PBS o tampón de fijación BD Cytofix™ (n.º de cat. 554655) a cada pocillo e incubándolo durante 10 minutos a temperatura ambiente (TA). 3. Retire el fijador de los pocillos y lave los pocillos dos veces con 100 μl de PBS 1×. 4. Diluya el anticuerpo en PBS 1× y tiña las células añadiendo 50 µl del anticuerpo diluido a cada pocillo e incubándolo durante 1 hora a temperatura ambiente. 5. Retire el anticuerpo diluido y lave los pocillos tres veces con 100 µl de PBS 1×. 6. Retire el PBS, diluya el reactivo de segundo paso en PBS 1× y tiña las células añadiendo 50 µl del reactivo de segundo paso diluido a cada pocillo e incubándolo durante 1 hora a temperatura ambiente. 7. Retire el reactivo de segundo paso diluido y lave los pocillos dos veces con 100 µl de PBS 1×. 8. Retire el PBS y realice una contratinción de los núcleos añadiendo 100 μl de una solución de 2 μg/ml de Hoechst 33342 (p. ej., Sigma-Aldrich, n.º de cat. B2261) en PBS 1× a cada pocillo al menos 15 minutos antes de la adquisición de la imagen. 9. Observe y analice las células en un instrumento de adquisición de imagen adecuado. Bioimagen: Para obtener más información, consulte http://www.bdbiosciences.com/support/resources/protocols/ceritifed_reagents.jsp. Western blot: Para obtener más información, consulte http://www.bdbiosciences.com/pharmingen/protocols/Western_Blotting.shtml.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Este anticuerpo ha sido desarrollado y certificado para la aplicación de bioimagen. Sin embargo, no se realiza una prueba de bioimagen de rutina en todos los lotes. Se recomienda a los investigadores titular el reactivo para un rendimiento óptimo.