BD, 554575, BD Pharmingen™ PE Anti-IL-12 humana de ratón (p40/p70)

Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de ratón
Inmunógeno: heterodímero p70 de IL-12 humana recombinante expresado en CHO
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395487
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo C11.5 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-12 en poblaciones celulares mixtas. Los anticuerpos C11.5 conjugados con FITC, PE o APC son especialmente adecuados para estos estudios (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con análisis por citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para conocer la metodología específica, visite la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de Función Inmunitaria, ambos publicados en nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo C11.5 conjugado con fluorocromo con un exceso de ligando (p. ej., IL-12 p70 humana recombinante o IL-12 p40 humana recombinante, antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con anticuerpo C11.5 no marcado antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es el clon PE-MOPC-21 (n.º de cat. 554680); úselo en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 millón de células).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Ficoll-Paque es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited.