BD, 555062, Células de control positivo de citocina humana HiCK-2 de BD Pharmingen™

Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 5x10^6 células/ml
ID de registro: AB_2869016
Tampón de almacenamiento: congelado en FBS y DMSO al 10%.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento a largo plazo de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas. Tras descongelar y resuspender completamente las células con una pipeta, las alícuotas de un solo uso pueden volver a congelarse a -80 °C y almacenarse en microtubos de polipropileno para su uso posterior.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Citometría de flujo: Control positivo de citocina HiCK-2 Las suspensiones celulares contienen IL-3, IL-4, IL-10, IL-13 y GM-CSF intracelulares que se han acumulado y son detectables mediante análisis de citometría de flujo intracelular. Estas células pueden servir como control positivo para verificar el rendimiento de los anticuerpos anticitocina y/o el propio procedimiento de tinción de citometría de flujo (p. ej., permeabilización). Para la tinción de citometría de flujo, primero se debe descongelar rápida y cuidadosamente la preparación celular congelada. Luego se pueden transferir alícuotas de la suspensión celular a micropocillos o tubos. Las células HiCK-2 se suministran fijadas y no permeabilizadas en dimetilsulfóxido (DMSO), por lo que se deben lavar al menos dos veces con tampón de tinción para eliminar el DMSO. Las células deben permeabilizarse incubándolas durante 10-15 minutos en el tampón BD Perm/Wash™ (n.º de cat. 554723), centrifugándolas hasta obtener un sedimento y, a continuación, realizándose al menos un lavado en tampón BD Perm/Wash™. Posteriormente, las células pueden teñirse con IL-3 antihumana de rata PE (n.º de cat. 554676), IL-4 antihumana de ratón PE (n.º de cat. 554516), IL-10 antihumana de rata PE (n.º de cat. 554706), IL-13 antihumana de rata PE (n.º de cat. 554571) o GM-CSF antihumano de rata PE (n.º de cat. 554507). Los investigadores deben tener en cuenta que para una detección óptima de IL-10 o IL-13, se deben adquirir ≥ 20 000 eventos en el citómetro de flujo. Nota: La tinción de las células HiCK-2 con anticuerpos específicos para citocinas puede demostrarse mediante la preincubación de un anticuerpo específico para citocinas conjugado con citocina recombinante o mediante el pretratamiento de las células HiCK-2 con un anticuerpo bloqueante no marcado (purificado). Los investigadores deben tener en cuenta que la variación con la activación celular puede contribuir a un bloqueo subóptimo.
Avisos del producto: Avisos del producto Este producto contiene sangre humana, suero, células o materiales derivados de ellos, que son materiales potencialmente peligrosos. Use precauciones universales al manipularlo. Manipular como si el producto fuera capaz de transmitir enfermedades. El material utilizado en este producto ha sido probado utilizando métodos aprobados por la FDA y se encontró negativo para el Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH-1/VIH-2), Antígeno de Superficie de la Hepatitis B (HBSAG) y anticuerpo para el Virus de la Hepatitis C (VHC). Sin embargo, ningún método de prueba conocido puede ofrecer una garantía completa de que las muestras de origen humano no transmitirán enfermedades infecciosas. Al manipular o desechar, siga las precauciones descritas en las recomendaciones de los CDC y la FDA y las recomendaciones de OSHA sobre patógenos transmitidos por la sangre. Limitaciones de uso del producto: Este producto es solo para uso en investigación. Los productos de investigación están etiquetados como Solo para uso en investigación (RUO) y no son para uso en procedimientos de diagnóstico o terapéuticos. El cliente acepta no utilizar el producto para fines que permitan la identificación de los donantes individuales. El cliente se compromete a notificar al Servicio Técnico de BDB dentro de los cinco (5) días hábiles siguientes a tener conocimiento de cualquier identificación o reidentificación de una persona en relación con este producto. Evite el contacto con la piel y los ojos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.