BD, 559318, BD Pharmingen™ PE Rat IgG1, κ Control de isotipo

Isotipo: IgG1 de rata, κ
Inmunógeno: inmunoglobulina de ratón
Aplicación: Citometría de flujo, control de isotipo (probado rutinariamente), tinción intracelular (citometría de flujo) (probado durante el desarrollo)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_397216
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente para citocinas intracelulares: La inmunoglobulina PE-R3-34 es un control de isotipo IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón o humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina para el análisis de citometría de flujo. Esta formulación de 100 Test Size del anticuerpo R3-34 conjugado con PE ha sido pretitulada para asegurar resultados efectivos como control de isotipo Ig para nuestros anticuerpos IgG1 de rata conjugados con PE de tamaño de prueba utilizando 20 µl/1 x 10^6 células. La técnica de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Para la metodología específica, visite la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular en el Manual de función inmunitaria, ambos publicados en nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com. Nota importante: Esta solución de anticuerpos pretitulados no contiene agente de permeabilización celular. Es necesario incluir un agente de permeabilización celular al utilizarla para teñir células fijadas y permeabilizadas. El tampón BD Perm/Wash™ (n.° de cat. 554723) contiene saponina, agente de permeabilización, y es útil para este fin, como se describe en la sección de Usos a continuación. Uso: 1. Resuspender 1 x 10^6 células fijadas y permeabilizadas en 20 µl de la solución de anticuerpos pretitulados y 30 µl de tampón BD Perm/Wash™ (n.° de cat. 554723). 2. Incubar la suspensión celular durante 15 minutos (a temperatura ambiente o 4 °C). 3. Lavar dos veces con 100 µl de tampón BD Perm/Wash (n.° de cat. 554723).
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Para los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.