BD, 559327, BD Pharmingen™ PE Ratón anti-IFN-γ humano

Nombre alternativo: IFNG; Interferón gamma; Interferón-γ; interferón tipo II; MAF
Reactividad: Humano (prueba de control de calidad), Rhesus, Cynomolgus, Babuino (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón, κ
Inmunógeno: proteína recombinante IFN-γ humana
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_397224
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo B27 conjugado con PE es útil para la tinción inmunofluorescente multicolor y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IFN-γ en poblaciones celulares mixtas (véase la imagen). Esta formulación de 100 muestras del anticuerpo B27 conjugado con PE ha sido pretitulada para asegurar una detección intracelular eficaz del IFN-γ humano utilizando 20 µl por 1 x 10e6 células. Para conocer la metodología específica, visite nuestro sitio web, http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources, y consulte la sección de protocolos en "Citocinas (tinción intracelular)" o "Flujo intracelular". También está disponible un control de isotipo de IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina, en una formulación de 100 muestras PE-MOPC-21 (n.° de cat. 559320). Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es el siguiente: prebloquear las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo B27 no marcado (n.° de cat. 554699/550011) antes de la tinción. La técnica de tinción de citocinas intracelulares y los controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Nota importante: Esta solución de anticuerpos pretitulados no contiene agente de permeabilización celular. Es necesario incluir un agente de permeabilización celular cuando se utiliza la solución de anticuerpos pretitulados para teñir células fijadas y permeabilizadas. El tampón Perm/Wash™ (n.° de cat. 554723) contiene saponina, agente de permeabilización, y es útil para este propósito, como se describe en la sección de USO a continuación. USO 1. Resuspender 1 x 10^6 células fijadas y permeabilizadas en 20 µl de la solución de anticuerpo pretitulada y 30 µl de tampón Perm/Wash™ 1X. 2. Incubar la suspensión celular durante 15 minutos (4 °C, en oscuridad). 3. Lavar dos veces con 100 µl de tampón Perm/Wash™ 1X.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Es posible que la reactividad cruzada de especies detectada durante el desarrollo del producto no se haya confirmado en todos los formatos o aplicaciones. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.