BD, 552596, BD Pharmingen™ Anti-PARP escindido de ratón purificado (Asp214)

Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Aplicación: Western blot (probado rutinariamente), inmunoprecipitación, tinción intracelular (citometría de flujo) (probado durante el desarrollo)
ID del gen Entrez: 142, 11545
Estado regulatorio: RUO
Descripción: Descripción PARP (Poli [ADP-Ribosa] Polimerasa) es una enzima asociada a la cromatina nuclear de 113 kDa que cataliza la transferencia de unidades de ADP-ribosa desde NAD + a una variedad de proteínas nucleares, incluyendo topoisomerasas, histonas y la propia PARP. La actividad catalítica de PARP aumenta en las células después del daño del ADN, y se cree que PARP desempeña un papel importante en la mediación de la respuesta celular normal al daño del ADN. Además, PARP es un objetivo de la actividad de la proteasa caspasa asociada con la apoptosis. La proteína PARP consta de un dominio de unión al ADN N-terminal (DBD) y un dominio catalítico C-terminal separados por un dominio de automodificación central. Durante la apoptosis, la Caspasa-3 escinde PARP en un sitio de reconocimiento (Asp Glu Val Asp Gly) en el DBD para formar fragmentos de 24 y 89 kDa. Este proceso separa el DBD (que se encuentra principalmente en el fragmento de 24 kDa) del dominio catalítico (en el fragmento de 89 kDa) de la enzima, lo que resulta en la pérdida de la función normal de PARP. Se ha propuesto que la inactivación de PARP dirige a las células dañadas del ADN a experimentar apoptosis en lugar de degradación necrótica, y la presencia de la fracción de escisión de PARP de 89 kDa se considera un marcador de apoptosis. Se utilizó un péptido correspondiente al extremo N del sitio de escisión (Asp 214) de PARP humana como inmunógeno. El anticuerpo monoclonal F21-852 reacciona solo con el fragmento de 89 kDa de PARP-1 humana que está aguas abajo del sitio de escisión de Caspasa-3 (Asp214) y contiene los dominios de automodificación y catalítico. No reacciona con PARP-1 humana intacta. Se desconoce la reactividad cruzada con otros miembros de la superfamilia PARP. Se ha demostrado el reconocimiento de PARP escindido en células de ratón, y también puede reaccionar de forma cruzada con varias otras especies debido a la naturaleza conservada de la molécula.
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. Conserve el anticuerpo (componente n.° 51-9000017) a 4 °C. Conserve el lisado (componente n.° 51-16606N) a -20 °C.
Procedimientos de ensayo recomendados: El lisado de Jurkat tratado con camptotecina [50 µg (1 µg/µl)] se proporciona como control positivo (51-16606N; conservar el lisado a -20 °C). Se dispone de lisado de Jurkat adicional sin tratar (n.° de cat. 611451) o como un conjunto que contiene lisados ​​sin tratar y tratados con camptotecina (n.° de cat. 550959) como controles de Western blot listos para usar. Otras aplicaciones que no se analizan rutinariamente en BD Biosciences Pharmingen incluyen la inmunoprecipitación (2 µg/300 µg de lisados) y la citometría de flujo. Se recomiendan los formatos directamente conjugados del clon para citometría de flujo (n.° de cat. 552933; consúltenos).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.
Descripción: Cantidad/Tamaño: Número de pieza: ID de EntrezGene
N/D : 50.0 : N/D : N/D