BD, 554164, proteína de retinoblastoma subfosforilada de ratón purificada de BD Pharmingen™ (RB)

Nombre alternativo: RB (aa 514-610)
Reactividad: Humana (prueba de control de calidad), Ratón (probado en desarrollo)
Isotipo: IgG1 de ratón
Inmunógeno: Rb humano recombinante de longitud completa
Aplicación: Inmunoprecipitación (probada rutinariamente)
Peso molecular objetivo: 105 kDa
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_395279
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. Conservar sin diluir a 4 °C.
Procedimientos de ensayo recomendados: Las aplicaciones de los procedimientos de ensayo recomendados incluyen inmunoprecipitación a 1-2 µg/un millón de células. Rb migra como bandas múltiples, estrechamente espaciadas, entre aproximadamente 110-116 kDa cuando se dimensiona en geles de poliacrilamida desnaturalizantes (es decir, mediante SDS/PAGE). Las bandas múltiples representan diferentes estados de fosforilación de Rb, las bandas de mayor peso molecular están más fosforiladas que las bandas de menor peso molecular. El nivel de fosforilación depende del ciclo celular y también puede depender del tipo de célula (no todas las formas se observan en todos los tipos de células que expresan Rb). Las condiciones del gel influyen en el número real de bandas observadas. En los casos en que se desee una separación óptima de las bandas, utilice un gel largo sin gradiente del 7 al 10 % (al menos 12 pulgadas). Se sugieren las células de leucemia humana MOLT-4 (ATCC CRL-1582) como control positivo.
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La azida sódica es un inhibidor reversible del metabolismo oxidativo; por lo tanto, las preparaciones de anticuerpos que contienen este agente conservante no deben usarse en cultivos celulares ni inyectarse en animales. La azida sódica puede eliminarse lavando las células teñidas o el anticuerpo unido a la placa o dializando el anticuerpo soluble en un tampón sin azida sódica. Dado que la endotoxina también puede afectar los resultados de los estudios funcionales, recomendamos el formato de anticuerpo NA/LE (sin azida/bajo endotoxina), si está disponible, para uso in vitro e in vivo.