Thermo Fisher, K457502, kit TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación, con vector pCR™4-TOPO™, E. coli químicamente competente One Shot™ TOP10 y kit de minipreparación de plásmidos PureLink™ Quick

Kit TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación, con el vector pCR™4-TOPO™, E. coli químicamente competente One Shot™ TOP10 y el kit PureLink™ Quick Plasmid Miniprep. Los kits TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación ofrecen una estrategia de clonación altamente eficiente, en un solo paso y en 5 minutos («Clonación TOPO™») para la inserción directa de productos de PCR amplificados por Taq-polimerasa en un vector plasmídico para secuenciación. Cada kit utiliza el vector pCR™4-TOPO™ TA con sitios de cebadores de secuenciación especialmente diseñados que generan más secuencia de inserto y menos secuencia de vector en cada reacción. Estos kits incluyen todo lo necesario para clonar y seleccionar vectores recombinantes que contienen el fragmento de PCR de su elección.
•Obtener más secuencia: permite más secuencia de inserción y menos secuencia de vector cuando se utilizan cebadores de secuenciación estándar
•Rápido y fácil: pase de PCR a clones en solo 3 pasos y en tan solo 5 minutos de tiempo práctico.
• Eficiente: consiga hasta un 95 % de clones con el inserto correcto
• Rendimiento confiable y comprobado durante más de una década con más de 4000 citas Descripción general del kit de secuenciación TOPO™ TA Cloning™
•VECTOR: pCR™4-TOPO™ TA Vector: vector de clonación optimizado para obtener mejores resultados de secuenciación
•MÉTODO DE CLONACIÓN: Clonación TOPO™ TA: ligadura de 5 minutos basada en topoisomerasa I de productos de PCR con salientes 3'A (amplificados con Taq) al vector
CÉLULAS COMPETENTES: Diversas opciones: elija entre kits con células competentes generales, de alta eficiencia, resistentes a bacteriófagos T1 o de rápido crecimiento. Vector pCR™4-TOPO™ TA: optimizado para secuenciación. Hemos eliminado gran parte del sitio de clonación múltiple del vector pCR™4-TOPO™ TA para acortar la distancia entre los sitios de cebador de secuenciación y el sitio de inserción a tan solo 33 pb. Esto significa que las reacciones de secuenciación generan menos secuencia del vector y más secuencia del inserto. El vector pCR™4-TOPO™ TA tiene sitios para cuatro cebadores de secuenciación comunes: M13 directo, M13 inverso, T7 y T3. Los kits incluyen una alícuota de cada uno.
Selección y manipulación de clones pCR™4-TOPO™ TA. El vector pCR™4-TOPO™ TA contiene marcadores de resistencia a ampicilina y kanamicina, así como una fusión del gen aLacZα-ccdB para la selección positiva y el cribado azul/blanco. El sitio de clonación múltiple minimizado del vector aún incluye sitios EcoRI flanqueantes para simplificar la escisión de los productos de PCR clonados y un sitio Sse8387I único para la generación de deleciones anidadas antes de la secuenciación. Los promotores T7 y T3 también están presentes para la transcripción in vitro.
Clonación simplificada basada en TOPO™. Con la tecnología de clonación TOPO™, no se necesitan primers de PCR con secuencias específicas, procedimientos post-PCR, preparación de vectores ni otros pasos de manipulación de ADN que requieren mucho tiempo. Simplemente añada su reacción de PCR directamente al vector con topoisomerasa, incube durante 5 minutos y transforme con las células competentes de E. coli proporcionadas.
Clonación eficiente. Con hasta el 95 % de clones con el inserto deseado, puede cribar menos clones para ahorrar tiempo y dinero. El vector pCR™4-TOPO™ TA utilizado en este kit incluye salientes 3'T para una ligación eficiente de productos de PCR amplificados por Taq con salientes 3'A.
El estándar en clonación. En materia de clonación, la tecnología TOPO™ ha sido un aliado confiable para miles de científicos durante más de diez años. Rápida, fácil de usar y eficiente, la clonación TOPO™ se ha aplicado a numerosos vectores para una amplia gama de aplicaciones.
Opciones del kit TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación El kit TOPO™ TA Cloning™ para secuenciación se puede adquirir con una variedad de células competentes que ofrecen diferentes ventajas según sus necesidades:
• Clonación general: TOP10 (n.º de cat. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Clonación de alta eficiencia: Celdas TOP10 Electrocomp™ (N.º de cat. K4580-01, K4580-40)
• Clonación general, resistencia al bacteriófago T1: DH5α-T1R (n.º de cat. K4595-01, K4595-40)
• Crecimiento rápido: Mach1™-T1R químicamente competente E. coli (n.° de cat. K4530-20) También ofrecemos una versión del kit que incluye un kit PureLink™ Quick Plasmid Miniprep (n.° de cat. K4575-02) para su uso en el aislamiento de plásmidos recombinantes limpios y listos para secuenciar.
Los productos TOPO™ son solo para uso en investigación. No están destinados a uso terapéutico ni diagnóstico en animales ni humanos.
Enlaces relacionados
•Servicios de construcción y clonación de vectores personalizados
Guía de selección del kit de purificación de ADN plasmídico
• Reactivos, instrumentos y suministros para PCR Cepa bacteriana o de levadura: TOP10
Tipo de célula: químicamente competente
Método de clonación: TOPO™-TA
Número de reacciones: 25 reacciones
Línea de productos: One Shot™
Tipo de producto: Kit de clonación
Promotor: T7, T3
Cantidad: 25 Reacciones
Vector: Vectores de clonación TOPO-TA
Formato: Kit
Tamaño de la unidad: cada una