Thermo Fisher, 23224, reactivo de ensayo de proteínas Pierce™ BCA B Thermo Scientific™

Reactivo B para el ensayo de proteínas Pierce™ BCA. El reactivo B para el ensayo de proteínas Thermo Scientific™ BCA es un componente del kit de ensayo de proteínas Pierce BCA, un ensayo de dos componentes, de alta precisión y compatible con detergentes, que se utiliza para la determinación de la concentración total de proteínas en comparación con un estándar de proteínas. Los reactivos Pierce BCA proporcionan una determinación precisa de la concentración de proteínas con la mayoría de los tipos de muestras utilizados en la investigación de proteínas. El ensayo Pierce BCA puede utilizarse para evaluar el rendimiento en lisados ​​de células completas, fracciones de columnas de afinidad y muestras de proteínas purificadas, así como para monitorizar la contaminación proteica en aplicaciones industriales. En comparación con la mayoría de los métodos de unión de colorantes, el ensayo BCA se ve mucho menos afectado por las diferencias en la composición proteica, lo que proporciona una mayor precisión de concentración.
Compare todos los ensayos de proteínas BCA disponibles ›Las características del kit de ensayo de proteínas BCA de Pierce (reactivos A y B) incluyen:
•Colorimétrico: calcule visualmente o mida con un espectrofotómetro estándar o un lector de placas a 562 nm
•Uniformidad: exhibe menos variación de proteína a proteína que los métodos de unión de colorantes (Bradford)
•Compatibilidad: no se ve afectada por las concentraciones típicas de la mayoría de los detergentes iónicos y no iónicos.
•Tiempo de ensayo: incubación de 30 minutos; mucho más fácil y cuatro veces más rápido que los métodos clásicos de Lowry
•Rango de ensayo: rango de trabajo lineal para BSA de 20 a 2000 μg/mL
Sensibilidad: detección de hasta 5 μg/mL con el protocolo mejorado. Cómo funciona el ensayo. El ensayo de proteínas BCA combina la conocida reducción de Cu₂+ a Cu₁+ por la proteína en un medio alcalino con la detección colorimétrica altamente sensible y selectiva del catión cuproso (Cu₁+) mediante ácido bicinconínico (BCA). El primer paso es la quelación del cobre con la proteína en un entorno alcalino para formar un complejo azul claro. En esta reacción, conocida como reacción de biuret, los péptidos que contienen tres o más residuos de aminoácidos forman un complejo quelado coloreado con iones cúpricos en un entorno alcalino que contiene tartrato de sodio y potasio.
En el segundo paso de la reacción de desarrollo de color, el BCA reacciona con el catión reducido (cuproso) formado en el primer paso. El producto de reacción, de color púrpura intenso, resulta de la quelación de dos moléculas de BCA con un ion cuproso. El complejo BCA/cobre es soluble en agua y presenta una fuerte absorbancia lineal a 562 nm al aumentar la concentración de proteína. El complejo es aproximadamente 100 veces más sensible (límite inferior de detección) que el color azul pálido de la primera reacción.
La reacción está fuertemente influenciada por cuatro residuos de aminoácidos (cisteína, cistina, tirosina y triptófano) en la secuencia de aminoácidos de la proteína. Sin embargo, a diferencia de los métodos de unión con el colorante Coomassie, la cadena principal peptídica universal también contribuye a la formación del color, lo que ayuda a minimizar la variabilidad causada por las diferencias en la composición proteica.
Productos relacionados: Kit de ensayo de proteínas Pierce BCA, Reactivo de ensayo de proteínas Pierce BCA, Ensayo sólido Pierce BCA: Ensayo BCA
Descripción: Reactivo B para el ensayo de proteínas Pierce BCA
Para usar con (aplicación): detección basada en solución, absorbancia
Para usar con (equipo): espectrofotómetro, lector de microplacas
Línea de productos: Pierce™
Tipo de producto: Ensayo de cuantificación de proteínas
Cantidad: 25 mL
Especificidad: No específica del objetivo
Método de detección: colorimétrico
Tamaño de la unidad: cada una