Thermo Fisher, 61005, Dynabeads™ Oligo(dT)25 Invitrogen™

Las perlas de aislamiento de ARNm Dynabeads™ Oligo(dT)25 de Invitrogen™ Dynabeads™ Oligo(dT)25 se dirigen y capturan específicamente moléculas de ARNm de prácticamente cualquier muestra cruda, eliminando la necesidad de purificar el ARN total cuando el ácido nucleico portador de información deseado es el ARNm. Dado que el ARNm representa solo entre el 1 % y el 5 % del ARN celular total, el aislamiento del ARN total no es la forma más eficiente de aislarlo. Otras tecnologías diseñadas para purificar el ARN total producen aproximadamente un 80 % de ARN ribosómico y obligan al ARNm a competir con el ARN ribosómico, el ARN de transferencia, el microARN, el ARN nucleolar pequeño y el ARN citoplasmático pequeño por la unión a la membrana. Ventajas de las perlas Dynabeads™ Oligo(dT)25:
• Un procedimiento rápido y suave produce ARNm puro e intacto.
• Aislamiento de ARNm extremadamente puro, la mejor opción antes de la síntesis de ADNc
El aislamiento de ARNm, de alta sensibilidad, permite la síntesis de ADNc y la construcción de bibliotecas de ADNc a partir de muestras iniciales ultrapequeñas (permite la construcción de bibliotecas de ADNc a partir de una sola célula). Funcionamiento de las microesferas: Las Dynabeads™ recubiertas de oligo(dT)25 se dirigen específicamente al transcriptoma de ARNm y lo capturan a partir de una amplia variedad de muestras iniciales crudas. El ARN ribosómico, el ADN, las proteínas y las moléculas de ARN pequeño (como el ARN de transferencia, el microARN y el ARN nucleolar pequeño) no se unen a las microesferas y se descartan. Solo se capturan las especies de ARN poliadenilado (ARNm). El ARNm aislado es puro, lo que elimina la necesidad de sustraer el ARN ribosómico o de un tratamiento con DNasa posterior a la extracción. Este sistema sin columnas garantiza la máxima recuperación del transcriptoma:
• Captura física de ARNm en perlas magnéticas móviles
• Procedimientos de manipulación magnética rápidos y suaves
• No se pierde ARNm durante giros con fuerza g alta
• No se atrapa ARNm en las membranas de la columna durante la elución. Aplicaciones: El ARNm es adecuado para todas las aplicaciones moleculares posteriores, como la clonación génica, la síntesis de ADNc, la construcción de bibliotecas de ADNc, la RT-PCR, la RT-PCR cuantitativa, el RPA (ensayo de protección de ribonucleasa), la hibridación sustractiva, la extensión de cebadores, la SAGE, la RACE y otras. Las perlas de aislamiento de ARNm Dynabeads™ Oligo(dT)25 son el método ideal de purificación de ARNm antes de la construcción de bibliotecas de ADNc. Su uso garantiza la máxima recuperación y enriquecimiento del transcriptoma. Estas perlas capturan una mayor cantidad de transcriptoma que con métodos que integran un paso de aislamiento total de ARN antes del aislamiento de ARNm.
Opciones de elución versátiles. La elución puede realizarse en cualquier volumen, hasta 5 μL. La elución de ARNm es opcional, ya que las reacciones enzimáticas en los procedimientos posteriores no se ven inhibidas por la presencia de Dynabeads™. Además, se puede realizar la síntesis de ADNc directamente en las microesferas para crear una biblioteca de ADNc en fase sólida reutilizable.
Volumen de elución: 10–20 μL
Tipo de producto final: ARNm
Para usar con (aplicación): qPCR
Compatibilidad de alto rendimiento: Compatible con alto rendimiento
Tipo de ligando: Oligo-dT
Tiempo de purificación: 15 min.
Cantidad: 5 mL
Condición de envío: Temperatura ambiente
Cantidad de material de partida: Células: ≤106 Planta: ≤100 mg Tejido: ≤50 mg ARN total: ≤75 μg
Rendimiento: 10 μg de ARNm por 1 mL de perlas (capacidad de unión)
Tecnología de aislamiento: Perlas magnéticas
Tamaño de la unidad: cada una