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BRAND / VENDOR: Thermo Fisher

Thermo Fisher, 77600, Imject™ mcKLH (en PBS)

CATALOG NUMBER: 77600
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Product Description

Imject™ mcKLH (en PBS) Thermo Scientific Imject Mariculture KLH es una proteína transportadora de hemocianina de lapa purificada que permite la preparación sencilla de inmunógenos altamente efectivos con antígenos peptídicos.
Características de Imject Mariculture KLH:
•Conjugación de alto rendimiento: cada molécula de KLH contiene cientos de aminas primarias disponibles para acoplar haptenos a través de reticuladores de éster EDC o NHS.
•Calidad validada: el KLH de maricultura purificado y estabilizado mantiene la solubilidad en soluciones acuosas, a diferencia de las fuentes tradicionales de la proteína transportadora.
•Fuente sustentable: KLH se obtiene de poblaciones seleccionadas del molusco Megathura crenulata (lapa) que se cultivan en maricultura, no se extrae de poblaciones silvestres.
•Altamente inmunogénico: KLH tiene una alta masa molecular (4.
5 x 105 a 1.
3 x 10⁻¹ Daltons; agregados de subunidades de 350 y 390 kDa) y provoca una respuesta inmunitaria más potente que la BSA o la ovoalbúmina. KLH es la proteína transportadora inmunogénica más popular, utilizada en la preparación de antígenos peptídicos para la inmunización y la producción de anticuerpos. Las preparaciones de KLH en tampón fosfato están listas para la conjugación de hapteno-transportador mediante reticulación con éster NHS reactivo a amina o glutaraldehído. Las preparaciones en tampón MES están optimizadas para la conjugación de péptido-transportador mediante el reticulante carbodiimida reactivo al carboxilo llamado EDC (o EDAC).
Las proteínas transportadoras son moléculas grandes y complejas capaces de estimular una respuesta inmunitaria tras la inyección. Producción exitosa de anticuerpos específicos para antígenos pequeños (i.
La inmunogenicidad (p. ej., péptidos o fármacos) requiere que estos haptenos se conjuguen covalentemente con una molécula más grande y compleja (generalmente una proteína) para hacerlos inmunogénicos. Las proteínas transportadoras se seleccionan en función de su inmunogenicidad, solubilidad y si se puede lograr una conjugación adecuada con el transportador.
La hemocianina de lapa californiana (KLH) se utiliza ampliamente como proteína transportadora para la conjugación con haptenos y otros antígenos, lo que los hace más inmunogénicos para la producción de anticuerpos. Debido a su gran masa y complejidad, la KLH genera una respuesta inmunitaria más potente que otras proteínas transportadoras. Dado que la proteína proviene de un molusco, es filogenéticamente distante de las especies de mamíferos y es menos probable que produzca anticuerpos que reaccionen de forma cruzada con las muestras diana típicas en los ensayos.
Imject Mariculture KLH (mcKLH) es KLH obtenida de lapas criadas en maricultura, en lugar de capturadas en la naturaleza. Imject mcKLH proporciona la máxima inmunogenicidad; se purifica y liofiliza en tampones que optimizan su estabilidad y solubilidad para la conjugación de hapteno. Al ser una proteína de gran tamaño, la KLH contiene cientos de aminas primarias y grupos carboxilo que pueden utilizarse para la conjugación con ésteres de NHS, EDC y otros reactivos de reticulación.
El reticulante de carbodiimida EDC conjuga haptenos que contienen carboxilo (p. ej.,
ej., extremo C de antígenos peptídicos) a la proteína transportadora KLH altamente inmunogénica para la inmunización y la producción de anticuerpos. Este método de preparación de inmunógenos es ideal para antígenos peptídicos con pocos o ningún residuo de ácido aspártico y glutámico (carboxilatos) y residuos de lisina (aminas primarias) dentro de la porción central de la secuencia primaria. Debido a que los péptidos contienen tanto carboxilato como aminas, la conjugación con EDC resulta en su polimerización diversa y orientación aleatoria en su enlace con la proteína transportadora. Típicamente, esto resulta en un alto nivel de carga de antígeno en la proteína transportadora, así como en la presentación en todas las orientaciones posibles para la producción de anticuerpos. Sin embargo, los epítopos importantes (deseados) dentro de la secuencia peptídica del antígeno pueden ser bloqueados por la conjugación mediada por EDC si esas regiones contienen aminas primarias (residuos de lisina) o carboxilatos (residuos de ácido aspártico y glutámico). En estos casos, utilice un reticulante amino-reactivo homobifuncional con el mcKLH purificado en tampón fosfato o sintetice el péptido con una cisteína terminal única y utilice un kit con mcKLH activado con malemida para preparar el conjugado de proteína transportadora.
Más datos del producto
•Datos de activación y conjugación de la proteína transportadora para la preparación de inmunógenos. Descripción: Inyectar mcKLH (en PBS). Solubilidad: A una concentración de 10 mg/ml en agua Milli-Q, la muestra es una solución transparente a azul turbio.
Cantidad: 5 x 20 mg
Línea de productos: Imject™
Tamaño de la unidad: cada una


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