Proteínas y péptidos Thermo Fisher: reactivos, kits y estándares

¡Bienvenidos! Esta colección seleccionada reúne reactivos y herramientas Thermo Fisher Scientific™ de alto rendimiento para flujos de trabajo de proteínas y péptidos, que abarcan extracción, cuantificación, preparación para LC-MS, purificación, marcaje, detección, controles y síntesis de péptidos. Como distribuidor autorizado, Iright puede suministrar una amplia gama de productos Thermo Fisher con presupuestos flexibles y entrega rápida para satisfacer las necesidades de su laboratorio.

Extracción y estabilización (lisis celular, inhibidores y tampones)

Una proteómica eficaz comienza con extractos proteicos limpios e intactos. Aquí encontrará tampones de lisis para muestras difíciles de lisar y combinaciones de inhibidores que preservan la fosforilación y previenen la proteólisis, de modo que la cuantificación posterior y la espectrometría de masas (MS) se mantengan reproducibles. Elija opciones sin EDTA cuando los pasos dependientes de metales (p. ej., IMAC) estén en la fase inicial de su flujo de trabajo.

Selecciones populares (ejemplos):

• Tampón de lisis y extracción RIPA , 100 mL — 89900.
  
• Cóctel inhibidor de proteasa y fosfatasa Halt™ (100X) , 1 mL — 78440; 24×100 µL — 78442.
  
• Cóctel inhibidor de proteasa Halt™ (100X), sin EDTA , 1 mL — 87785; estándar, 1 mL — 87786.
  
• Solución TCEP Bond-Breaker™, pH neutro, 5 mL — 77720.

Cuantificación de proteínas (kits de ensayo y estándares)

La concentración precisa de proteínas garantiza una digestión consistente, una carga uniforme y una cuantificación fiable. Las químicas Thermo Scientific™ BCA, Micro BCA, Coomassie/Bradford y Rapid Gold abarcan amplios rangos dinámicos y diversas químicas de muestra, incluyendo lisados ​​ricos en detergentes.

Soluciones a las que recurrir:

• Kit de ensayo de proteínas Pierce™ BCA — 23225.
  
• Kit de análisis de proteínas Micro BCA — 23235.
  
• Kit de ensayo de proteínas Coomassie Plus (Bradford) — 23236.
  
• Rapid Gold BCA (formato estándar A53227 o sin dilución A55860).
• Estándares BSA, ampollas de 2 mg/ml — 23209.

Digestión y preparación de muestras para LC-MS

La elección de la enzima y la limpieza definen la cobertura y la sensibilidad. Utilice proteasas de grado MS para una escisión reproducible, luego desalinice y elimine los surfactantes con columnas de centrifugación para proteger su LC-MS y potenciar las identificaciones. Los productos a continuación son productos de eficacia comprobada y compatibles con Orbitrap.

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Purificación y afinidad (herramientas de His-Tag y anticuerpos)

La captura por afinidad mejora la pureza, el rendimiento y la confianza en los ensayos posteriores. Las resinas IMAC de níquel o cobalto enriquecen las proteínas con etiqueta His, mientras que las microesferas magnéticas de proteína A/G optimizan la purificación de IP y anticuerpos en imanes o robots.

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Etiquetado y reticulación (colorantes y reticulantes reactivos con aminas)

Desde la biotinilación de anticuerpos hasta la MS de reticulación con restricción de distancia, los reactivos de alta pureza garantizan modificaciones específicas y estables. Seleccione biotina pegilada para mayor solubilidad, ésteres NHS para aminas primarias y reticulantes escindibles cuando la identificación por MS lo requiera.

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Detección por WB/ELISA (sustratos, membranas y secundarios)

Una detección fiable reduce el límite de detección y el rango dinámico. Elija sustratos ECL adaptados a la abundancia, PVDF para una fuerte unión a proteínas y sustratos secundarios HRP validados para blots y ELISA limpios.

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Normas y controles (marcadores de MW e idoneidad del sistema)

Los estándares le ayudan a comparar entre ejecuciones e instrumentos. Combine los estándares de BSA para la calibración de ensayos con escalas de peso molecular para la validación de geles, y añada péptidos PRTC para monitorizar el rendimiento de la LC-MS a lo largo del tiempo.

• Escalera de proteínas preteñida PageRuler™ Plus (10–250 kDa) — 26619.
  
• Marcador de peso molecular de proteína sin teñir Pierce™ — 26610.
  
• Estándares BSA Pierce™, 2 mg/mL — 23209.
  
• Mezcla de péptidos Pierce™ PRTC — 88321.

Fundamentos de la síntesis de péptidos (reactivos, resinas y componentes básicos)

Para la síntesis de péptidos en fase sólida (SPPS), reactivos de acoplamiento fiables y aminoácidos Fmoc de alta pureza mantienen la fidelidad de la secuencia y el rendimiento. Thermo Scientific™ Chemicals (Acros/Alfa Aesar) ofrece acopladores y resinas de uso generalizado, compatibles con las estrategias estándar de Fmoc.

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Almacenamiento y manipulación (Guía rápida)

Un almacenamiento adecuado preserva la actividad y el rendimiento. Muchos inhibidores se envían fríos y se almacenan a 4 °C ; los sustratos ECL y las enzimas suelen requerir refrigeración; los colorantes fluorescentes y los ésteres NHS suelen conservarse desecados a -20 °C , protegidos de la luz. Consulte siempre la ficha técnica de cada producto para conocer las condiciones exactas.

Matriz de aplicaciones (selección según necesidad)

Preguntas frecuentes

P1. ¿Son compatibles los productos Pierce™, Invitrogen™ y Thermo Scientific™ en todos los flujos de trabajo?
Sí, estas marcas de Thermo Fisher están diseñadas para interoperar en extracción, cuantificación, LC-MS, inmunoensayos e imágenes. Combine las químicas (p. ej., sin EDTA con IMAC; reactivos de grado MS para LC-MS) para obtener los mejores resultados.

P2. ¿Qué ECL debo elegir para la prueba Western blot?
Utilice West Pico PLUS para la mayoría de los objetivos; cambie a West Femto para proteínas con muy baja abundancia. Combínelo con membranas de PVDF y un bloqueo optimizado para minimizar el ruido de fondo.

P3. ¿Cuándo debo elegir cobalto en lugar de níquel para la purificación de His-tag?
El cobalto generalmente proporciona una mayor pureza con una capacidad ligeramente menor; se utiliza cuando la selectividad es lo más importante o los contaminantes persisten después del Ni-NTA.

P4. ¿Es necesario eliminar el detergente antes de la LC-MS?
Sí, los detergentes iónicos y no iónicos típicos suprimen la ionización. Utilice columnas de centrifugación para la eliminación de detergentes o un limpiador C18 antes de la inyección.

P5. ¿Cuál es la ventaja de DSSO frente a DSS/BS³?
El DSSO se puede escindir mediante MS, lo que simplifica la identificación de péptidos reticulados; los DSS/BS³ son caballos de batalla no escindibles para el mapeo y estabilización estructural.

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