Agilent, GK80090, AdvanceBio O-glicanasa

O-glicanasa AdvanceBio. Esta enzima libera GalGalNAc ligada a Ser/Thr no sustituida de las proteínas y puede utilizarse con enzimas adicionales para eliminar estructuras O-ligadas más complejas. También conocida como endo-O-glicosidasa, endo-α-N-acetilgalactosaminidasa y O-glicosidasa. Incluye tampón de reacción A 5X [fosfato de sodio 250 mM, pH 5,0].

Presupuesto:
Aplicación: Detección de O-glicosilación en proteínas
Concentración: ≥1,25 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Análisis de la biosíntesis de glicoproteínas. Bioactividad en O-glicanos. Detección de O-glicosilación en proteínas. Análisis de epítopos y sitios de unión. Desglicosilación de glicoproteínas. Análisis estructural de O-glicanos.
Formulación enzimática: 20 mM Tris HCl pH 7,5 que contiene 25 mM NaCl.
Fuente de la enzima: Gen recombinante de Streptococcus pneumoniae, expresado en E. coli.
Actividad específica de la enzima: ≥12 unidades/mg
Especificidad enzimática: La enzima es altamente específica y libera Galß1-3GalNAc a partir de residuos de serina o treonina, ya sea sola o como parte de glucopéptidos o glucoproteínas. No existe una preferencia aparente por la serina sobre la treonina. La sustitución del núcleo disacárido con residuos de ácido siálico, fucosa, N-acetilglucosamina o N-acetilgalactosamina previene la escisión del enlace Galß1-3GalNAc-Ser/Thr. La ausencia del residuo de galactosa o del grupo acetamido en el residuo de N-acetilgalactosamina más interno también previene la escisión del enlace Galß1-3GalNAc-Ser/Thr. La O-glicanasa está incluida en el kit de desglicosilación enzimática de Agilent para glicanos unidos a N y unidos a O simples (GK80110), que se puede utilizar junto con nuestro kit extensor de Agilent para glicanos unidos a O complejos (GK80115).
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de 1 µmol de Galß1-3GalNAca1-p-nitrofenol por minuto a 37 °C, pH 5,5.
Peso molecular: ~180 kD
Unidad: 50 mU
Volumen: 40 µL
pH óptimo: 5,5
Rango de pH: 5-7

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La O-glicanasa AdvanceBio es una enzima altamente específica diseñada para eliminar los glicanos O-ligados de las glicoproteínas, lo que facilita un análisis optimizado de glicanos en la investigación biofarmacéutica y académica. Este reactivo permite la desglicosilación eficiente y reproducible de proteínas O-glicosiladas en condiciones suaves, preservando la integridad proteica y garantizando la compatibilidad con análisis posteriores, tanto cualitativos como cuantitativos. Es especialmente adecuada para la caracterización de terapias con glicoproteínas, la elaboración de perfiles de estructuras de glicanos en muestras biológicas y el apoyo a estudios detallados de modificaciones postraduccionales de proteínas. La enzima está optimizada para su uso en flujos de trabajo que incorporan HPLC, LC-MS y técnicas analíticas relacionadas, ofreciendo resultados fiables en diversos tipos de muestras. Compatible con las columnas e instrumentación LC AdvanceBio de Agilent, se integra a la perfección en flujos de trabajo consolidados para el mapeo y la caracterización de glicanos. La alta pureza y el alto rendimiento de esta enzima reducen la actividad de fondo y promueven datos limpios e interpretables, lo que facilita tanto el análisis rutinario de glicanos como la investigación avanzada sobre la función de las glicoproteínas. Además, ofrece una alternativa eficiente a los laboriosos métodos de liberación de sustancias químicas, mejorando el rendimiento y la repetibilidad en los laboratorios de glicomicina. Este producto es una herramienta esencial para los científicos que realizan estudios detallados de glicosilación o desarrollan protocolos de control de calidad para productos biofarmacéuticos.