Agilent, GKE-5002, AdvanceBio Endoglicosidasa H

Endoglicosidasa H de AdvanceBio. Esta enzima escinde el núcleo de N,N'-diacetilquitobiosa (GlcNAc-GlcNAc) de la manosa alta y algunos N-glicanos de tipo híbrido. Incluye tampón de reacción 5x para GKE-5002 (citrato/fosfato de sodio 500 mM, pH 5,5), solución de desnaturalización (2 % SDS/1 M βME) y solución de detergente (15 % solución de detergente).

Presupuesto:
Aplicación: Análisis de la biosíntesis de glicoproteínas.
Concentración: ≥0,15 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Liberación selectiva de oligosacáridos N-ligados con alto contenido de manosa a partir de glucopéptidos/glicoproteínas. La enzima se ha utilizado ampliamente en la caracterización de glucoproteínas, glicanos ligados a dolicol y en la vía biosintética de la N-glicosilación.
Formulación enzimática: 50 mM de fosfato de sodio pH 7,5, 25 mM de EDTA y 0,05 % de azida de sodio
Fuente de la enzima: Gen recombinante de Streptomyces plicatus, expresado en E. coli. La enzima también se conoce como endoglicosidasa H, manosil-glicoproteína endo-beta-N-acetilglucosaminidasa.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 60 µmoles de ribonucleasa B desnaturalizada en 1 hora a 37 °C, pH 5,5.
Unidad: 30 mU
Volumen: 200 µL
pH óptimo: 5,5

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Esta enzima endoglicosidasa H de alta pureza está específicamente formulada para la escisión eficiente y selectiva de glicanos con alto contenido de manosa y ciertos glicanos híbridos N-ligados de las glicoproteínas. Optimizada para una reproducibilidad y un rendimiento robusto, facilita la rápida caracterización estructural y el perfilado de glicanos en los flujos de trabajo de investigación biofarmacéutica y control de calidad. La enzima permite un análisis preciso de los patrones de glicosilación, lo que facilita la identificación, cuantificación y monitorización de variantes de glicanos durante el desarrollo y la fabricación de candidatos.

Ideal para su uso en protocolos de preparación de muestras previos a la cromatografía líquida, la espectrometría de masas o la electroforesis capilar, este reactivo se integra a la perfección con los kits de mapeo de glicanos AdvanceBio y las columnas LC AdvanceBio de Agilent. Facilita un análisis optimizado al combinarse con los sistemas LC 1290 Infinity de Agilent, el LC/Q-TOF 6545XT AdvanceBio y otros sistemas analíticos relacionados. Gracias a su alta actividad y bajo fondo, el producto facilita una rápida desglicosilación incluso con bajas relaciones enzima-sustrato, preservando así la integridad de la muestra para análisis posteriores sensibles.

Una guía completa de aplicaciones garantiza una integración fiable en los procesos analíticos establecidos para la caracterización de anticuerpos monoclonales, el desarrollo de biosimilares, el cribado de líneas celulares y la evaluación de la calidad de proteínas terapéuticas. La compatibilidad con una amplia gama de condiciones de tampón y sustratos de glicoproteínas mejora la flexibilidad del flujo de trabajo en diversos entornos de laboratorio.