Agilent, GKE-5006A-05, AdvanceBio N-glicanasa (PNGasa F), ≥2,5 U/ml

AdvanceBio N-glicanasa (PNGasa F), ≥2,5 U/mL. La enzima (una forma recombinante de la PNGasa F) libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. Se suministra en 5 viales de GKE-5006A (5 x 100 mU, ≥2,5 U/mL, 1 mM EDTA). Incluye tampón de reacción de N-glicanasa 5x, solución de desnaturalización, solución de detergente y tampón de reacción Tris de N-glicanasa 5x (aplicaciones de MS). Para una formulación más concentrada de ≥10 U/mL, que puede ser útil para digestores nativos, consulte GKE-5010B o GKE-5020B (sin EDTA).

Presupuesto:
Concentración: ≥2,5 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Preparación de proteínas desglicosiladas para estimación de peso molecular o estudios cristalográficos. Liberación de glicanos N-ligados intactos de glicopéptidos y glicoproteínas. Estudios de estructura y función de glicoproteínas N-glicosiladas.
Formulación enzimática: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM EDTA (pH 7,5)
Fuente de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum [1]. La enzima también se conoce como PNGasa F, péptido-N-glicosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa.
Especificidad enzimática: Escinde todos los oligosacáridos complejos, híbridos o ricos en manosa, a menos que tengan el núcleo fucosilado α(1-3), como en los glicanos vegetales y algunos glicanos de insectos. La asparagina debe tener enlaces peptídicos en ambos extremos. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión. Este producto no contiene Endo F.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 μmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a 37 °C, pH 7,5.
Peso molecular: ~35.000 daltons
Unidad: 500 mU
Volumen: 40 µL
pH óptimo: 8,6
Rango de pH: 7,5-9,5

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AdvanceBio N-Glicanasa es una enzima peptídica N-glicosidasa F recombinante altamente purificada, formulada a una concentración de 2,5 unidades por ml. Está específicamente diseñada para la escisión y liberación eficientes de oligosacáridos N-ligados de las glicoproteínas, tanto en condiciones desnaturalizantes como no desnaturalizantes. Esta enzima permite una desglicosilación rápida y fiable, esencial para la caracterización estructural, el perfil de glicanos y el control de calidad en el desarrollo y la investigación biofarmacéutica.

Ideal para su uso en laboratorios biofarmacéuticos y académicos, esta solución se integra a la perfección en flujos de trabajo que implican la preparación de muestras para análisis por cromatografía líquida o espectrometría de masas. AdvanceBio N-Glicanasa facilita la liberación de glicanos de alto rendimiento en diversos tipos de muestras, a la vez que mantiene la integridad de la cadena principal de la proteína.

Es totalmente compatible con los kits de mapeo de glicanos AdvanceBio de Agilent, las columnas UHPLC y las herramientas de preparación de muestras, lo que facilita el análisis optimizado de glicoproteínas. La enzima puede utilizarse con sistemas automatizados para aplicaciones de alto rendimiento, así como en protocolos manuales de sobremesa. La N-glicanasa AdvanceBio es compatible con aplicaciones de investigación como la caracterización de glicoproteínas, el análisis de la glicosilación de anticuerpos y el control de calidad de proteínas terapéuticas, lo que permite una elucidación detallada de la estructura de los glicanos y resultados analíticos consistentes.