Agilent, GKE-5008, AdvanceBio Endo F2, recombinant

AdvanceBio Endo F2, recombinante. La enzima se divide en el núcleo de quitobiosa (GlcNAc-GlcNAc) de N-glicanos de tipo complejo biantenario y con alto contenido de manosa. Incluye tampón de reacción 5X, que al diluirse proporciona 200 mM de acetato de sodio a pH 4,5.

Presupuesto:
Aplicaciones enzimáticas: Liberación selectiva de oligosacáridos N-ligados de tipo complejo biantenario y con alto contenido de manosa a partir de glicopéptidos/glicoproteínas.
Formulación enzimática: 10 mM de acetato de sodio pH 4,5, 25 mM de NaCl, 0,02 % de azida de sodio
Origen de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum. La enzima también se conoce como endoglicosidasa F2, endo-beta-N-acetilglucosaminidasa.
Especificidad de la enzima: La enzima escinde dentro del núcleo de di-N-acetil quitobiosa (GlcNAc-GlcNAc) de glicanos N-enlazados de tipo complejo biantenario y de alto contenido en manosa de sustratos de oligosacáridos, glicopéptidos o glicoproteínas. Un solo residuo de GlcNAc permanece unido a la molécula después de la hidrólisis, el resto del glicano se libera. Esta especificidad es distinta de la PNGasa F (GKE-5006), que escinde entre la asparagina y el GlcNAc más interno de los glicanos N-enlazados. EndoF2 escinde entre GlcNAc-GlcNac en glicanos biantenarios a una velocidad aproximadamente 20 veces mayor que en los glicanos de alto contenido en manosa. La enzima no es activa hacia oligosacáridos de tipo híbrido o tri- y tetraantenarios.
Definición de unidad enzimática: Una miliunidad se define como la cantidad de enzima que hidrolizará 1 nM del sustrato glicopéptido de fibrinógeno porcino dansilado DnsVGEN(CHO)R por minuto a pH 4,5 y 37 °C.
Unidad: 6 mU
Volumen: 60 µL
pH óptimo: 4,5

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AdvanceBio Endo F2 es una endoglicosidasa recombinante altamente purificada, diseñada para la eliminación eficiente de glicanos ligados a N de las glicoproteínas. Diseñada para una actividad óptima y una mínima contaminación por proteasas, esta enzima escinde específicamente el núcleo de quitobiosa de la manosa alta y ciertos N-glicanos híbridos, lo que permite a los investigadores estudiar las cadenas principales de glicoproteínas intactas y analizar sus estructuras con confianza. Su alta especificidad y producción recombinante proporcionan un rendimiento consistente y fiabilidad entre lotes, lo que la hace ideal para flujos de trabajo en caracterización de glicoproteínas, control de calidad biofarmacéutico y estudios de biología estructural. AdvanceBio Endo F2 es compatible con los sistemas HPLC de cromatografía líquida de alta resolución y las plataformas MS de espectrometría de masas de Agilent, y se integra a la perfección con las columnas y los kits de preparación de muestras enzimáticas de Agilent AdvanceBio. Sus aplicaciones incluyen la determinación de perfiles de glicanos, la confirmación de la ocupación de glicanos y el análisis de terapias con proteínas recombinantes. La enzima se suministra con protocolos detallados para facilitar su uso en entornos de laboratorio regulados. Su flujo de trabajo optimizado reduce el tiempo de preparación de las muestras y mantiene una alta integridad de las mismas, lo que contribuye a un análisis preciso de la glicosilación en entornos de descubrimiento, desarrollo y control de calidad. Este reactivo es un componente esencial para aplicaciones avanzadas de investigación biofarmacéutica y glicomética que requieren una desglicosilación precisa y eficiente.