Agilent, GKE-5010D, AdvanceBio N-Glicanasa-plus (PNGasa F), ≥10 U/mL

AdvanceBio N-Glicanasa-plus (PNGasa F), ≥10 U/mL. La enzima libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. Una forma recombinante de PNGasa F, 200 mU, 1 mMEDTA. El envase GKE-5010D no incluye tampones de reacción; sin embargo, estos están disponibles bajo pedido.

Presupuesto:
Concentración: 10 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Para lograr una desglicosilación eficiente de sustratos de glicoproteínas en condiciones no desnaturalizantes, es necesario utilizar una mayor concentración inicial de enzima. N-Glicanasa PLUS y ULTRA (sin EDTA) se suministran a 10 U/ml y se recomiendan para todas las aplicaciones que requieren la desglicosilación de glicoproteínas en ausencia de desnaturalizantes. Su alta actividad también permite explorar volúmenes y tiempos de reacción más cortos.
Formulación enzimática: 20 mM Tris HCl pH 7,5, que contiene 1 mM EDTA y 50 mM NaCl
Origen de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum. La enzima también se conoce como PNGasa F, péptido-N-glicosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa.
Actividad específica de la enzima: ≥10 unidades/mg
Especificidad enzimática: Escinde todos los oligosacáridos complejos, híbridos o ricos en manosa, a menos que tengan un núcleo fucosilado (1-3), como en los glicanos vegetales. La asparagina debe estar unida mediante enlaces peptídicos en ambos extremos. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión. Libre de Endo F. Altamente concentrado, especialmente útil para la desglicosilación en condiciones nativas.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 µmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a pH 7,5 y 37 °C.
Peso molecular: ~35.000 daltons
Unidad: 1 U
Volumen: 100 µL
pH óptimo: 8,6
Rango de pH: 7,5-9,5

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AdvanceBio N-Glycanase-plus es una enzima PNGasa F recombinante de alto rendimiento, suministrada en una concentración mínima de 10 unidades por mililitro. Este producto elimina eficazmente los glicanos ligados a N de las glicoproteínas, lo que lo convierte en una herramienta esencial para los investigadores que realizan perfiles, caracterización y análisis estructural de glicanos. Es ideal para flujos de trabajo analíticos en desarrollo biofarmacéutico, control de calidad y estudios glicómicos, garantizando una desglicosilación fiable y consistente en diversos tipos de muestras, incluyendo anticuerpos monoclonales, proteínas recombinantes y productos plasmáticos.

Diseñada para ser compatible con las soluciones de mapeo de glicanos AdvanceBio de Agilent, esta enzima se integra a la perfección en los flujos de trabajo de análisis de glicanos HPLC y LCMS establecidos. Complementa productos como las columnas y kits de marcaje AdvanceBio Glycan Mapping, mejorando la precisión y el rendimiento al combinarse con los sistemas LC 1290 Infinity, LC 1260 Infinity II y UHPLC de Agilent. El protocolo optimizado permite la preparación de muestras tanto manual como automatizada, minimizando el tiempo de inactividad y maximizando la reproducibilidad. Purificada según altos estándares, la enzima proporciona una baja actividad de fondo y una mínima contaminación por proteasas, lo que proporciona resultados precisos incluso en muestras biológicas complejas. AdvanceBio N-Glycanase-plus es ideal para laboratorios que buscan un rendimiento de desglicosilación robusto para un análisis de glicosilación completo y una caracterización bioterapéutica regulada.