Agilent, GKE-5020B, AdvanceBio N-Glicanasa-ultra (PNGasa F, sin EDTA), ≥10 U/mL

AdvanceBio N-Glicanasa-ultra (PNGasa F, sin EDTA), ≥10 U/ml. Una forma recombinante de PNGasa F (400 mU, sin EDTA) libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. La misma formulación disponible en GlykoPrep, ≥10 U/ml y sin EDTA. Incluye tampón de reacción de N-glicanasa 5x, solución de desnaturalización y solución de detergente.

Presupuesto:
Concentración: 10 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Para lograr una desglicosilación eficiente de sustratos de glicoproteínas en condiciones no desnaturalizantes, es necesario utilizar una mayor concentración inicial de enzima. N-Glicanasa PLUS y ULTRA (sin EDTA) se suministran a 10 U/ml y se recomiendan para todas las aplicaciones que requieren la desglicosilación de glicoproteínas en ausencia de desnaturalizantes. Su alta actividad también permite explorar volúmenes y tiempos de reacción más cortos.
Formulación enzimática: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl (pH 7,5, formulación sin EDTA).
Origen de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum. La enzima también se conoce como endoglicosidasa F2, endo-beta-N-acetilglucosaminidasa. La enzima también se conoce como PNGasa F, péptido-N-glucosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa.
Actividad específica de la enzima: ≥10 unidades/mg
Especificidad enzimática: Escinde todos los oligosacáridos complejos, híbridos o ricos en manosa, a menos que tengan un núcleo fucosilado (1-3), como en los glicanos vegetales. La asparagina debe estar unida mediante enlaces peptídicos en ambos extremos. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión. Libre de Endo F. Altamente concentrado, especialmente útil para la desglicosilación en condiciones nativas.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 µmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a 37 °C, pH 7,5.
Peso molecular: ~35.000 Daltons
Unidad: 400 mU
Volumen: 40 µL
pH óptimo: 8,6
Rango de pH: 7,5-9,5

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AdvanceBio N-Glycanase-ultra es un péptido:N-glicosidasa F recombinante de alta pureza, diseñado para la liberación eficiente de glicanos N-ligados de las glicoproteínas. Suministrada con una potencia de al menos 10 unidades por mililitro y formulada sin EDTA, esta enzima está optimizada para protocolos sensibles de análisis de glicanos. Su composición sin EDTA garantiza la compatibilidad con metales nativos y aplicaciones posteriores que requieren enzimas dependientes de metales o reactivos de marcaje. Permite una desglicosilación rápida y completa en condiciones nativas o desnaturalizantes, lo que facilita los flujos de trabajo en la caracterización biofarmacéutica, la determinación de perfiles de glicoproteínas y el control de calidad de productos biológicos.

AdvanceBio N-Glycanase-ultra es apto para la preparación de muestras para análisis HPLC, UHPLC y LC-MS, lo que facilita la evaluación cuantitativa y de alto rendimiento de la heterogeneidad de N-glicanos. Esta enzima es ideal para laboratorios que realizan mapeo de glicanos con anticuerpos monoclonales, estudios de comparabilidad de biosimilares o investigación académica en glicosilación de proteínas. Se integra perfectamente con las columnas AdvanceBio Glycan Mapping, los sistemas LC Agilent InfinityLab y 1290 Infinity II, y el software Agilent MassHunter, lo que garantiza resultados robustos y reproducibles. Gracias a su rápida y completa capacidad de desglicosilación y a su amplia compatibilidad, este reactivo es un componente clave para un análisis de glicanos preciso y optimizado en investigación avanzada y entornos regulados.