Agilent, GKE-5020B-5, AdvanceBio N-Glicanasa-ultra (PNGasa F, sin EDTA), ≥10 U/mL

AdvanceBio N-Glicanasa-ultra (PNGasa F, sin EDTA), ≥10 U/mL. Una forma recombinante de PNGasa F, libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. La misma formulación que se proporciona en GlykoPrep, ≥10 U/mL y sin EDTA. Se suministra en 5 viales de 400 mU de GKE-5020B. Incluye tampón de reacción de N-glicanasa 5x, solución de desnaturalización y solución de detergente.

Presupuesto:
Concentración: 10 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Para lograr una desglicosilación eficiente de sustratos de glicoproteínas en condiciones no desnaturalizantes, es necesario utilizar una mayor concentración inicial de enzima. N-Glicanasa PLUS y ULTRA (sin EDTA) se suministran a 10 U/ml y se recomiendan para todas las aplicaciones que requieren la desglicosilación de glicoproteínas en ausencia de desnaturalizantes. Su alta actividad también permite explorar volúmenes y tiempos de reacción más cortos.
Formulación enzimática: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl (pH 7,5, formulación sin EDTA).
Origen de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum. La enzima también se conoce como endoglicosidasa F2, endo-beta-N-acetilglucosaminidasa. La enzima también se conoce como PNGasa F, péptido-N-glucosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa.
Actividad específica de la enzima: ≥10 unidades/mg
Especificidad enzimática: Escinde todos los oligosacáridos complejos, híbridos o ricos en manosa, a menos que tengan un núcleo fucosilado (1-3), como en los glicanos vegetales. La asparagina debe estar unida mediante enlaces peptídicos en ambos extremos. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión. Libre de Endo F. Altamente concentrado, especialmente útil para la desglicosilación en condiciones nativas.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 µmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a 37 °C, pH 7,5.
Peso molecular: ~35.000 Daltons
Unidad: 2000 mU
Volumen: 400 µL
pH óptimo: 8,6
Rango de pH: 7,5-9,5

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AdvanceBio N-Glycanase-ultra es una péptido-N-glicosidasa F recombinante altamente purificada, diseñada para la desglicosilación eficiente y fiable de N-glicanos de las glicoproteínas. Libre de EDTA, esta preparación enzimática se suministra en una concentración de al menos 10 unidades por mililitro, lo que garantiza una actividad óptima para análisis posteriores sensibles. Su robusta formulación permite la liberación precisa y rápida de N-glicanos intactos en condiciones suaves, lo que la hace ideal para la preparación de muestras en la caracterización biofarmacéutica, el control de calidad y el análisis de perfiles de glicosilación.

El producto es compatible con diversas plataformas analíticas de Agilent, como LC, LC-MS y electroforesis capilar, lo que garantiza una integración perfecta en los flujos de trabajo de análisis de glicanos establecidos. Es especialmente adecuado para su uso con columnas de mapeo de glicanos AdvanceBio y los kits de preparación de muestras correspondientes, lo que permite análisis de alta resolución y resultados reproducibles.

AdvanceBio N-Glycanase-ultra se recomienda para investigadores dedicados al desarrollo de anticuerpos monoclonales, estudios de biosimilares, investigación de vacunas o terapias con glicoproteínas, donde la liberación precisa de N-glicanos es crucial. La ausencia de EDTA reduce el riesgo de interferencia de cationes metálicos, lo que facilita su uso en aplicaciones con enzimas dependientes de metales o sistemas de detección sensibles. Este reactivo fiable optimiza el procesamiento de muestras de glicanos, ofreciendo un rendimiento consistente para las exigentes necesidades de investigación y análisis.