Agilent, GKE-5020D, AdvanceBio N-Glicanasa-ultra (PNGasa F, sin EDTA), ≥10 U/mL

AdvanceBio N-Glicanasa-ultra (PNGasa F, sin EDTA), ≥10 U/mL. Una forma recombinante de PNGasa F (1 U, sin EDTA) libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. La misma formulación disponible en GlykoPrep, ≥10 U/mL y sin EDTA. El envase GKE-5020D no incluye tampones de reacción, aunque estos están disponibles bajo petición.

Presupuesto:
Concentración: ≥10 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Para lograr una desglicosilación eficiente de sustratos de glicoproteínas en condiciones no desnaturalizantes, es necesario utilizar una mayor concentración inicial de enzima. N-Glicanasa PLUS y ULTRA (sin EDTA) se suministran a 10 U/ml y se recomiendan para todas las aplicaciones que requieren la desglicosilación de glicoproteínas en ausencia de desnaturalizantes. Su alta actividad también permite explorar volúmenes y tiempos de reacción más cortos.
Formulación enzimática: 20 mM Tris HCl pH 7,5, 50 mM NaCl
Origen de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum. La enzima también se conoce como endoglicosidasa F2, endo-beta-N-acetilglucosaminidasa. La enzima también se conoce como PNGasa F, péptido-N-glucosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa.
Actividad específica de la enzima: ≥10 unidades/mg
Especificidad enzimática: Escinde todos los oligosacáridos complejos, híbridos o ricos en manosa, a menos que tengan un núcleo fucosilado (1-3), como en los glicanos vegetales. La asparagina debe estar unida mediante enlaces peptídicos en ambos extremos. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión. Libre de Endo F. Altamente concentrado, especialmente útil para la desglicosilación en condiciones nativas.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 µmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a 37 °C, pH 7,5.
Peso molecular: ~35.000 Daltons
Unidad: 1 U
Volumen: 100 µL
pH óptimo: 8,6
Rango de pH: 7,5-9,5

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AdvanceBio N-Glycanase-ultra es un péptido N-glicosidasa F recombinante de alta pureza, formulado sin EDTA, que ofrece niveles de actividad de al menos 10 unidades por mililitro. Esta enzima escinde rápidamente los oligosacáridos N-ligados de las glicoproteínas, lo que permite un análisis exhaustivo de glicanos, crucial para el desarrollo biofarmacéutico, el control de calidad y la caracterización. Su composición sin EDTA la hace totalmente compatible con procesos posteriores sensibles a los quelantes metálicos, como la espectrometría de masas y los flujos de trabajo basados ​​en HPLC.

Optimizada para un rendimiento fiable, esta enzima es compatible con aplicaciones rigurosas, como la liberación y el perfilado de N-glicanos de anticuerpos monoclonales, proteínas de fusión y otros tratamientos. Su preparación garantiza una desglicosilación eficiente tanto en condiciones desnaturalizantes como nativas, lo que reduce el tiempo de preparación de la muestra y preserva la integridad de la proteína.

AdvanceBio N-Glycanase-ultra es compatible con las soluciones de análisis de glicanos de Agilent, como las columnas de mapeo de glicanos AdvanceBio y los sistemas LC-MS, y también con una amplia gama de instrumentación analítica para estudios glicómicos y proteómicos. Es un reactivo indispensable para investigadores y laboratorios analíticos especializados en estudios de estructura y función de glicoproteínas, garantizando una caracterización precisa y reproducible de glicanos en entornos regulatorios o de descubrimiento.