Agilent, GKE-5020D-10, AdvanceBio N-Glicanasa-ultra (PNGasa F, sin EDTA), ≥10 U/mL

AdvanceBio N-Glicanasa-ultra (PNGasa F, sin EDTA), ≥10 U/ml. La enzima (una forma recombinante de PNGasa F, sin EDTA) libera N-glicanos intactos mediante la escisión entre la GlcNAc más interna y la Asn. La misma formulación disponible en GlykoPrep, ≥10 U/ml y sin EDTA. Se suministra en 10 viales de GKE-5020D (10 x 1 U, ≥10 U/ml). El envase de GKE-5020D no incluye tampones de reacción, aunque estos están disponibles bajo petición.

Presupuesto:
Concentración: ≥10 U/mL
Aplicaciones enzimáticas: Para lograr una desglicosilación eficiente de sustratos de glicoproteínas en condiciones no desnaturalizantes, es necesario utilizar una mayor concentración inicial de enzima. N-Glicanasa PLUS y ULTRA (sin EDTA) se suministran a 10 U/ml y se recomiendan para todas las aplicaciones que requieren la desglicosilación de glicoproteínas en ausencia de desnaturalizantes. Su alta actividad también permite explorar volúmenes y tiempos de reacción más cortos.
Formulación enzimática: 20 mM Tris HCl pH 7,5, 50 mM NaCl
Origen de la enzima: Gen recombinante de Elizabethkingia meningoseptica, expresado en E. coli. El microorganismo fuente se conocía anteriormente como Chryseobacterium [Flavobacterium] meningosepticum. La enzima también se conoce como endoglicosidasa F2, endo-beta-N-acetilglucosaminidasa. La enzima también se conoce como PNGasa F, péptido-N-glucosidasa F, péptido-N4-(N-acetil-β-glucosaminil)asparagina amidasa.
Actividad específica de la enzima: ≥10 unidades/mg
Especificidad enzimática: Escinde todos los oligosacáridos complejos, híbridos o ricos en manosa, a menos que tengan un núcleo fucosilado (1-3), como en los glicanos vegetales. La asparagina debe estar unida mediante enlaces peptídicos en ambos extremos. Los grupos fosfato, sulfato y ácido siálico unidos al oligosacárido no afectan la escisión. Libre de Endo F. Altamente concentrado, especialmente útil para la desglicosilación en condiciones nativas.
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de oligosacáridos ligados a N de 1 µmol de ribonucleasa B desnaturalizada por minuto a 37 °C, pH 7,5.
Peso molecular: ~35.000 Daltons
Unidad: 10 U
Volumen: 100 µL
pH óptimo: 8,6
Rango de pH: 7,5-9,5

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AdvanceBio N-Glycanase-ultra es una solución optimizada de enzima PNGasa F recombinante, disponible en una concentración mínima de 10 unidades por mililitro y formulada sin EDTA. Diseñado para la liberación eficiente de glicanos N-ligados de las glicoproteínas, este reactivo es ideal para el desarrollo biofarmacéutico, la caracterización de glicoproteínas y los procesos de control de calidad que requieren un análisis preciso de glicanos. Su formulación sin EDTA garantiza la compatibilidad con muestras sensibles a metales y con los procesos posteriores de espectrometría de masas o HPLC.

Esta enzima realiza una desglicosilación rápida y completa en condiciones estándar de desnaturalización o nativas, lo que aumenta el rendimiento y la fiabilidad del perfil de glicanos. Sus aplicaciones típicas incluyen el perfil de glicanos de anticuerpos terapéuticos, la elucidación estructural de la glicosilación de proteínas y la caracterización de bioprocesos.

AdvanceBio N-Glycanase-ultra se integra a la perfección con los flujos de trabajo de Mapeo de Glicanos AdvanceBio de Agilent y complementa los instrumentos HPLC y LC-MS de Agilent, incluyendo los sistemas LC 1290 Infinity y MS Q-TOF 6545. También es compatible con las columnas y kits de Mapeo de Glicanos AdvanceBio, lo que garantiza una preparación de muestras optimizada y resultados fiables. El producto cuenta con control de calidad para garantizar una alta especificidad y actividad, lo que lo convierte en un reactivo esencial para laboratorios dedicados al desarrollo de productos biológicos y al análisis exhaustivo de glicoproteínas.