Agilent, GKX-5010, α(1-2,3,6)-Manosidasa (alubia canavalia)

α(1-2,3,6)-Manosidasa (canavalia). La enzima libera manosa con enlaces α(1-2,3,6) terminales no reductores de oligosacáridos. Incluye tampón de incubación [(500 mM de acetato de sodio, 10 mM de cloruro de zinc (pH 5,0)]].

Presupuesto:
Concentración: 150 U/mL
Formulación enzimática: 20 mM Tris-HCl, 20 mM NaCl (pH 7,5)
Fuente de la enzima: judía canavalia.
Especificidad de la enzima: La enzima presenta una amplia especificidad, escindiendo la manosa con enlace α(1-2,3,6), aunque se ha observado cierta preferencia cinética (α1-2, 6 > 3). La enzima no escinde un solo residuo de manosa con enlace α(1-6) de la β-manosa central, pero sí elimina una sola manosa con enlace α1-3 de la β-manosa central. Mediante concentraciones de enzima de aproximadamente 50 U/ml y tiempos de incubación prolongados (hasta 18 horas) a 37 °C, se puede lograr la eliminación completa de todos los residuos de manosa con enlace α terminal no reductor. Para agilizar los estudios de secuenciación de glicanos, la actividad lenta de la α-manosidasa de canavalia GKX-5010 hacia los residuos de manosa con enlaces α(1-6) puede compensarse utilizando la enzima con la α-manosidasa de Xanthomonas mannihotis, que escinde rápidamente los enlaces α(1-6). La α-manosidasa de X. mannihotis puede inhibir la acción de otras manosidasas si el sustrato contiene manosa ramificada (α1-6), por lo que se suele añadir tras la incubación del sustrato con la α-manosidasa de canavalia (GKX-5010).
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima que hidrolizará 1 µmol de pNP-α-manopiranósido por minuto a pH 4,5 y 37 °C.
Peso molecular: ~190 kD
Unidad: 10 U
Volumen: 70 µL
pH óptimo: 4,5

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Esta enzima α(1-2,3,6)-manosidasa altamente purificada, procedente de la canavalia, permite la escisión eficiente y específica de residuos terminales de manosa no reductores con enlaces α de oligosacáridos, glicoproteínas y glicopéptidos. Su amplia especificidad de sustrato la convierte en una herramienta versátil para el análisis estructural detallado de carbohidratos complejos y la determinación de perfiles de glicanos en laboratorios de bioquímica y biología molecular. Su uso es esencial en procesos de desglicosilación, la caracterización de glicoproteínas y la elucidación de patrones de ramificación de glicanos, aspectos cruciales para la investigación bioterapéutica y el control de calidad.

Adecuada para diversas aplicaciones, como estudios glicómicos basados ​​en espectrometría de masas, HPLC y electroforesis capilar, esta enzima se integra perfectamente con los kits de análisis de glicanos y los sistemas de preparación de muestras de Agilent. También es compatible con una amplia gama de instrumentos analíticos, como las plataformas LC y LC-MS de Agilent. El producto se suministra con protocolos de uso detallados para optimizar las condiciones de reacción y garantizar la reproducibilidad experimental. Los investigadores que trabajan en proteómica, glicómica e investigación biomédica encontrarán esta manosidasa valiosa para agilizar el procesamiento y el análisis preciso de las estructuras de glicanos N-ligados de diversas muestras biológicas.