Agilent, GKX-5010-50, α(1-2,3,6)-manosidasa

α(1-2,3,6)-Manosidasa. La manosidasa (de albahaca) 50 U, ≥150 U/ml, libera manosa con enlaces α(1-2,3,6) terminales no reductores de oligosacáridos. Se suministra en 5 viales de GKX-5010. Incluye tampón de incubación [(500 mM de acetato de sodio, 10 mM de cloruro de zinc (pH 5,0)]].

Presupuesto:
Concentración: 150 U/mL
Formulación enzimática: 20 mM Tris-HCl, 20 mM NaCl (pH 7,5)
Fuente de la enzima: judía canavalia.
Especificidad de la enzima: La enzima presenta una amplia especificidad, escindiendo la manosa con enlaces α(1-2,3,6), aunque se ha observado cierta preferencia cinética (α1-2, 6 > 3). La enzima no escinde un solo residuo de manosa con enlaces α(1-6) de la β-manosa central, pero sí elimina una sola manosa con enlaces α1-3 de la β-manosa central. Mediante concentraciones de enzima de aproximadamente 50 U/ml y tiempos de incubación prolongados (hasta 18 horas) a 37 °C, se puede lograr la eliminación completa de todos los residuos de manosa con enlaces α terminales no reductores. Para agilizar los estudios de secuenciación de glicanos, la actividad lenta de la α-manosidasa de canavalia GKX-5010 hacia los residuos de manosa con enlaces α(1-6) puede compensarse utilizando la enzima en combinación con la α-manosidasa de Xanthomonas mannihotis, que escinde rápidamente los enlaces α(1-6). La α-manosidasa de X. mannihotis puede inhibir la acción de otras manosidasas si el sustrato contiene manosa ramificada (α1-6), por lo que suele añadirse tras la incubación del sustrato con la α-manosidasa de canavalia (GKX-5010).
Definición de unidad enzimática: Una unidad se define como la cantidad de enzima que hidrolizará 1 µmol de pNP-α-manopiranósido por minuto a pH 4,5 y 37 °C.
Peso molecular: ~190 kD
Unidad: 50 U
Volumen: 70 µL
pH óptimo: 4,5

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Esta glicosidasa altamente purificada cataliza específicamente la hidrólisis de residuos de manosa no reductores terminales alfa-1,2, alfa-1,3 y alfa-1,6 de oligosacáridos N-ligados. Su amplia especificidad de sustrato la hace esencial para la caracterización estructural detallada de glicoproteínas y oligosacáridos complejos. La enzima está optimizada para flujos de trabajo de análisis de glicanos in vitro, lo que facilita la eliminación secuencial o selectiva de residuos de manosa durante el mapeo de glicanos, la glicoingeniería o el análisis de epítopos en el desarrollo biofarmacéutico.

Suministrado como una solución lista para usar, este producto muestra una actividad alta y constante en diversas glicoproteínas biológicas y recombinantes, incluyendo anticuerpos y enzimas terapéuticas. Es compatible con la gama de kits de marcaje de glicanos, instrumentos HPLC y LC/MS de Agilent, así como con otros sistemas comunes de preparación y análisis de muestras. Los investigadores pueden utilizarlo para el control de calidad, la elucidación estructural y la monitorización de la heterogeneidad de glicanos en entornos de investigación, preclínicos y regulados.

Esta enzima complementa las soluciones integrales de análisis de glicanos de Agilent, lo que permite flujos de trabajo robustos y fiables. Es ideal para laboratorios académicos, clínicos e industriales dedicados a la investigación de glicoproteínas, la producción de anticuerpos terapéuticos o el descubrimiento de biomarcadores. El producto incluye un protocolo detallado para un rendimiento y una reproducibilidad óptimos.