BD, 550067, IL-4 recombinante de ratón BD Pharmingen™

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, la IL-4 recombinante de ratón (n.º de cat. 550067) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 a 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina sérica humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 a 10 mg/ml. Para ensayos biológicos in vitro, se sugieren concentraciones de proteína transportadora de 0,5 a 1 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede producirse una pérdida de actividad. Este producto no debe diluirse a menos de 50 µg/ml para un almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a su toxicidad, altos niveles de endotoxinas o posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: La IL-4 de ratón es útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína IL-4 de ratón en un ELISA sándwich específico para IL-4 con el anticuerpo 11B11 purificado (n.° de cat. 554434) como anticuerpo de captura y el clon biotinilado BVD6-24G2 (n.° de cat. 554390) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se deben incluir diluciones dobles del estándar de IL-4 de ratón de ~2000 a 15 pg/mL con cada placa ELISA. Este par de ELISA se recomienda principalmente para la medición de citocinas en sistemas de cultivo celular experimental, no para el análisis de muestras de suero o plasma. Para la medición de IL-4 en suero o plasma, el kit BD OptEIA™ para IL-4 de ratón (n.° de cat. 555232) está especialmente formulado y se recomienda. Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de bioensayo no se analiza rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente titularlo e incluir controles adecuados en los experimentos pertinentes. Se ha reportado previamente un rango de actividad de 0,3 a 2,0 x 10^8 unidades/mg, con una DE50 de 50 a 300 pg/mL, utilizando células indicadoras MC/9 para la proliferación con MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio), y una unidad definida como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima en la saturación de citocinas.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.