BD, 550070, BD Pharmingen™ IL-10 recombinante de ratón

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, la IL-10 recombinante de ratón (n.º de cat. 550070) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 a 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina sérica humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 a 10 mg/ml. Para ensayos biológicos in vitro, se sugieren concentraciones de proteína transportadora de 1 a 2 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede producirse una pérdida de actividad. Este producto no debe diluirse a menos de 50 µg/ml para un almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a su toxicidad, altos niveles de endotoxinas o posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: La IL-10 de ratón es útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína IL-10 de ratón en un ELISA sándwich específico para IL-10 con el anticuerpo JES5-2A5 purificado (n.° de cat. 551215) como anticuerpo de captura y el clon biotinilado SXC-1 (n.° de cat. 554423) o JES-16E3 (n.° de cat. 554465) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se deben incluir diluciones dobles del estándar de IL-10 de ratón de ~2000 a 15 pg/mL con cada placa ELISA. Este par de ELISA se recomienda principalmente para la medición de citocinas en sistemas de cultivo celular experimental, no para el análisis de muestras de suero o plasma. Para la medición de IL-10 en suero o plasma, se recomienda el kit BD OptEIA™ para IL-10 de ratón (n.° de cat. 555252). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de bioensayo no se analiza rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente que lo titulen e incluyan controles adecuados en los experimentos pertinentes. Se ha descrito previamente un rango de actividad de 1,0 a 6,6 x 10^5 ng/mL, con una DE50 de 0,5 a 100 ng/mL, utilizando células indicadoras D36 coestimuladas con IL-4 recombinante de ratón (n.° de cat. 550067) a 50 pg/mL para promover la proliferación, incubadas durante 24 horas antes de ser pulsadas con MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.