BD, 550524, BD Pharmingen™ Retrievagen A (pH 6.0)

Estado regulatorio: RUO
ID de registro: AB_2868889
Descripción: BD Retrievagen A (pH 6.0) es un sistema de recuperación de antígenos recomendado para cortes de tejido fijados con zinc y formalina e incluidos en parafina que presentan una reactividad subóptima o nula con anticuerpos para la tinción inmunohistoquímica. La formalina tamponada neutra al 10% fija el tejido mediante la reticulación de proteínas, lo que puede causar un cambio conformacional o enmascaramiento del epítopo antigénico, lo que resulta en una reactividad reducida o nula de los anticuerpos. BD Retrievagen A (pH 6.0) está diseñado para desenmascarar el epítopo y potenciar la tinción de anticuerpos. El mecanismo propuesto por el cual funcionan la mayoría de los sistemas de recuperación de antígenos es la ruptura de los enlaces cruzados formados entre las moléculas de proteína. Es importante tener en cuenta que, a pesar de la recuperación de antígenos, algunos anticuerpos no se tiñen en cortes fijados con formalina e incluidos en parafina. En estas situaciones, puede ser útil fijar el tejido con un fijador menos agresivo, como el fijador de zinc para IHC desarrollado por BD Pharmingen (n.° de cat. 550523). En muchos casos, nuestro fijador de zinc preserva el epítopo, lo que permite una buena tinción de anticuerpos y, al mismo tiempo, muestra una buena morfología tisular. Sin embargo, algunos antígenos no se preservan con una fijación suave, y en estos casos, la única alternativa es usar tejido fresco congelado para la tinción inmunohistoquímica.
Preparación y almacenamiento: Preparación y almacenamiento Conservar sin diluir a 4°C.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados BD Pharmingen Retrievagen A (pH 6,0) se proporciona como dos soluciones separadas que deben mezclarse. Tome 18 ml de la solución 1 de BD Retrievagen A y 82 ml de la solución 2 de BD Retrievagen y complete el volumen a 1 litro con agua destilada. El pH de la solución de trabajo final debe ser de alrededor de 6,0. Esta solución de trabajo puede almacenarse a 4 °C hasta por un mes. El protocolo de recuperación de antígeno se realiza después de desparafinar los portaobjetos como se describe a continuación. 1. Desparafine los portaobjetos (después de secarlos completamente durante la noche a temperatura ambiente) en 2 cambios de xileno durante 10 minutos cada uno. 2. Lave los portaobjetos en alcohol al 100% dos veces durante 2 minutos cada uno. 3. Bloquee la actividad de la peroxidasa endógena incubando durante 10 minutos en H2O2 al 3%. Enjuague 2-3 veces en agua. 4. Coloque los portaobjetos en un frasco Coplin de plástico o en una placa de tinción con la solución de trabajo de BD Retrievagen A y caliéntelos a 90 °C en el microondas. 5. Mezcle la solución e incube los portaobjetos a la temperatura deseada de 90 °C durante 10 minutos. 6. Retire la placa de tinción, cúbrala y deje que los portaobjetos se enfríen lentamente a temperatura ambiente durante 20 minutos. 7. Lave los portaobjetos con 2 o 3 cambios de agua y continúe con el bloqueo con suero normal y la aplicación del anticuerpo primario.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.
Descripción: Cantidad/Tamaño: Número de pieza: ID de EntrezGene
N/D : 100.0 : N/D : N/D