BD, 550618, Control de isotipo IgG1 κ de ratón BD Pharmingen™ PE-Cy™5

Isotipo: Ratón BALB/c IgG1, κ
Aplicación: Citometría de flujo, control de isotipos (probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_479689
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy5 (anteriormente conocido como BD Cy-Chrome™) en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy5 libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 1 µg/millón de células para citometría de flujo). Recomendamos el mAb MOPC-21 IgG1 κ de ratón conjugado con PE-Cy5 (n.º de cat. 555750) para la tinción inmunofluorescente de sangre humana completa y el mAb MOPC-21 (n.º de cat. 557224) para células de primates no humanos. Se ha descrito que los fluorocromos en tándem PE-Cy5 se unen a algunas clases de macrófagos y granulocitos humanos a través de receptores Fc, y que el PE se une a los linfocitos B de ratón a través de receptores Fc. La preincubación de leucocitos de ratón con el anticuerpo monoclonal anti-CD16/CD32 de ratón purificado Mouse BD Fc Block™ 2.4G2 (n.° de cat. 553141/553142) puede reducir la unión inespecífica de los reactivos conjugados con PE-Cy5 a los linfocitos B de ratón. Además, hemos observado una interacción específica entre los fluorocromos en tándem de PE-Cy5 y los esplenocitos de ratones SJL, NOD y MRL: los linfocitos B y otros subgrupos de leucocitos presentan una tinción intensa, y Mouse BD Fc Block™ no tiene un efecto significativo. Por lo tanto, no se deben utilizar reactivos conjugados con PE-Cy5 para teñir leucocitos de ratones SJL, NOD o MRL. Los reactivos conjugados con PE, PerCP, PerCP-Cy5.5, aloficocianina (APC) y fluorocromo en tándem APC-Cy7 se pueden utilizar en leucocitos de estas cepas de ratón.
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para obtener los protocolos técnicos. Para los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de la luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que ocurre en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con esos reactivos, a la iluminación ambiental. PE-Cy5 está optimizado para su uso con un solo láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem PE-Cy5, se debe tener especial cuidado al utilizar citómetros de láser dual que pueden excitar directamente tanto PE como Cy5™. PE-Cy5 es un fluorocromo en tándem compuesto de R-ficoeritrina (PE), que se excita con la luz de 488 nm de un láser de iones de argón y sirve como donador de energía, acoplado al colorante de cianina Cy5, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 670 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en PE-Cy5, maximizando así la intensidad de su emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual de PE y minimizando la variación entre lotes. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Cy es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited. Este producto conjugado se vende bajo licencia de las siguientes patentes: Patentes de EE. UU. n.º 5.486.616; 5.569.587; 5.569.766; 5.627.027. Este producto está sujeto a los derechos de propiedad de Amersham Biosciences Corp. y la Universidad Carnegie Mellon, y se fabrica y vende bajo licencia de Amersham Biosciences Corp. Este producto tiene licencia de venta únicamente para investigación. No está autorizado para ningún otro uso. Si necesita una licencia comercial para usar este producto y no la tiene, devuelva este material sin abrir a BD Biosciences, 10975 Torreyana Rd, San Diego, CA 92121, y se le reembolsará el importe pagado por el material.