BD, 550756, Conjunto de transferasa terminal antihumana de ratón FITC de BD Pharmingen™

Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Estado regulatorio: RUO
ID de registro: AB_2094455
Descripción: Reacciona con la desoxirribonucleotidiltransferasa terminal (TdT), una ADN polimerasa independiente de la plantilla que añade nucleótidos a cebadores de ADN monocatenario. El análisis Western blot de TdT revela bandas de 55, 40 y 15 kDa. La TdT se encuentra en células progenitoras linfoides de médula ósea normal y en linfocitos tímicos inmaduros. Se ha descrito que la TdT participa en la regulación y/o translocación del ADN y la reorganización génica durante el desarrollo normal de los linfocitos T y B.
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con FITC en condiciones óptimas y se eliminó el FITC no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Protocolo de tinción de los procedimientos de ensayo recomendados: 1. Coseche las células diana cultivadas en un tubo de centrífuga cónico de 50 ml. Centrifugue a 1000 rpm durante 10 minutos, aspire y deseche el sobrenadante. 2. Lave el pellet celular una vez con PBS y mezcle suavemente. Centrifugue a 1000 rpm durante 10 minutos, aspire y deseche el sobrenadante. 3. Fije las células añadiendo 15-20 ml de formaldehído al 1% mientras agita el pellet e incube durante 20 minutos a temperatura ambiente. Centrifugue a 1000 rpm durante 10 minutos, aspire y deseche el sobrenadante. 4. Añada 15-20 ml de Triton X-100 al 0,1% en PBS e incube durante 5-10 minutos. Centrifugue a 1000 rpm durante 10 minutos, aspire y deseche el sobrenadante. 5. Resuspender en PBS + 1% FBS (tampón de lavado) hasta una concentración final de aproximadamente 1 x 10^6 por 50 µl. 6. Preparar un tubo con 50 µl de suspensión celular y añadir 20 µl de anti-TdT humana conjugada. Preparar otro tubo con 50 µl de suspensión celular y añadir 20 µl de control de isotipo conjugado. Agitar suavemente e incubar en oscuridad a temperatura ambiente durante 20-30 minutos. 7. Lavar los tubos con 2 ml de tampón de lavado. Centrifugar durante 5 minutos a 1000 rpm, aspirar y desechar el sobrenadante. 8. Resuspender en 500 µl de tampón de lavado y analizar mediante citometría de flujo.
Avisos del producto: Este anticuerpo ha sido optimizado y preensayado con su control de isotipo correspondiente para su uso al volumen recomendado de 20 ul/prueba. NO se recomienda la titulación de los reactivos ni su sustitución por otro control de isotipo (no correspondiente). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos.
Descripción: Cantidad/Tamaño: Número de pieza: ID de EntrezGene
N/D : 100.0 : N/D : N/D