BD, 551137, BD Pharmingen™ PE-Cy™5 Ratón anti-CD137 humano

Nombre alternativo: 4-1BB, ILA, TNFRSF9
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: Ratón BALB/c IgG1, κ
Inmunógeno: proteína de fusión 4-1BB humana recombinante
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
Número de taller: VI C-7
ID de registro: AB_394067
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con PE-Cy5 (anteriormente conocido como BD Cy-Chrome™) en condiciones óptimas, eliminándose el anticuerpo no conjugado y el PE-Cy5 libre.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. PE-Cy5 está optimizado para su uso con un solo láser de iones de argón que emite luz de 488 nm. Debido al amplio espectro de absorción del fluorocromo en tándem PE-Cy5, se debe tener especial cuidado al usar citómetros de láser dual que pueden excitar directamente tanto PE como Cy5™. PE-Cy5 es un fluorocromo en tándem compuesto por R-ficoeritrina (PE), que se excita con la luz de 488 nm de un láser de iones de argón y actúa como donante de energía, acoplado al colorante de cianina Cy5, que actúa como aceptor de energía y fluoresce a 670 nm. BD Biosciences Pharmingen ha maximizado la transferencia de energía del fluorocromo en PE-Cy5, maximizando así la intensidad de su emisión de fluorescencia, minimizando la emisión residual de PE y la variación entre lotes. Se ha descrito que los fluorocromos en tándem PE-Cy5 se unen a algunas clases de macrófagos y granulocitos humanos a través de receptores Fc, y que PE se une a linfocitos B de ratón a través de receptores Fc. La preincubación de leucocitos de ratón con el anticuerpo monoclonal anti-CD16/CD32 de ratón purificado Mouse BD Fc Block™ 2.4G2 puede reducir la unión inespecífica de los reactivos conjugados con PE-Cy5 a los linfocitos B de ratón. Sin embargo, no deben utilizarse reactivos conjugados con PE-Cy5 para teñir esplenocitos de ratones SJL, NOD y MRL, ya que se ha descrito que los linfocitos B u otros leucocitos presentan una tinción inespecífica independientemente del uso de Mouse BD Fc Block™ (el complejo CD72c se ha relacionado con la unión de PE-Cy5 en estas cepas). Los reactivos conjugados con PE, PerCP, PerCP-Cy5.5, APC y el fluorocromo en tándem APC-Cy7 pueden utilizarse en leucocitos de estas cepas de ratón. Cy es una marca registrada de GE Healthcare. Tenga en cuenta las siguientes precauciones: La absorción de luz visible puede alterar significativamente la transferencia de energía que se produce en cualquier conjugado de fluorocromo en tándem; por lo tanto, recomendamos tomar precauciones especiales (como envolver los viales, tubos o gradillas en papel de aluminio) para evitar la exposición de los reactivos conjugados, incluidas las células teñidas con dichos reactivos, a la luz ambiental. Para consultar los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Para consultar los protocolos técnicos, visite www.bdbiosciences.com/us/s/resources.