BD, 551219, BD Pharmingen™ Anti-IL-12 p40/p70 de ratón purificado de rata

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: proteína p70 IL-12 de ratón recombinante expresada en CHO
Aplicación: Captura ELISA (Probada rutinariamente)
Concentración: 1,0 mg/ml
ID de registro: AB_394097
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. Conservar sin diluir a 4 °C.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Captura ELISA: IL-12 p40 ELISA: El anticuerpo C15.6 purificado es útil como anticuerpo de captura para un ELISA sándwich que mide la cantidad total de p40 en solución (complejado como homodímero o heterodímero, así como monómero libre). El anticuerpo C15.6 purificado se puede emparejar con el anticuerpo C17.8 biotinilado (Cat. No. 554476) como anticuerpo de detección, con proteína IL-12 p70 de ratón recombinante (Cat. No. 554592; ver figura) o proteína IL-12 p40 (Cat. No. 554594; datos no mostrados) como estándar. El anticuerpo C15.6 purificado debe titularse 6-10 µg/ml para determinar la concentración óptima para la captura ELISA. Para obtener curvas estándar lineales, se recomiendan diluciones dobles de la proteína IL-12 de ratón de entre ~4000 y 30 pg/ml para su inclusión en cada placa ELISA. Para una sensibilidad máxima, se recomienda una incubación durante la noche (4 °C) de las muestras/estándares con el anticuerpo de captura recubierto. Nota: Para analizar la IL-12 p40 de ratón en fluidos biológicos complejos como suero o plasma, se recomienda el kit ELISA BD OptEIA™ para IL-12 p40 de ratón (n.º de cat. 555165). Para analizar la IL-12 p70 de ratón en suero o plasma, se recomienda el kit ELISA BD OptEIA™ para IL-12 p70 de ratón (n.º de cat. 555256). Control de bloqueo para la tinción intracelular: El anticuerpo C15.6 purificado puede utilizarse como control de bloqueo para demostrar la especificidad de la tinción de IL-12 mediante C15.6 conjugado directamente. Para realizar este control, las células fijadas/permeabilizadas (aproximadamente un millón) pueden incubarse con 1-10 µg de anticuerpo C15.6 purificado durante 20 minutos a 4 °C, antes de teñirlas con C15.6 conjugado directamente (p. ej., 0,1-0,5 µg de mAb/1 millón de células). La técnica de tinción intracelular de citocinas y el uso de controles de bloqueo se describen detalladamente en C. Prussin y D. Metcalfe. Para consultar la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular y citometría de flujo del Manual de Función Inmunitaria.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.