BD, 552032, BD Pharmingen™ Anticuerpo antihumano de rata purificado CXCR5 (CD185)

Nombre alternativo: CD185; Receptor 5 del motivo CXC de quimiocina; BLR1; MDR-15
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: LOU de rata, también conocida como Louvain, LOU/C, LOU/M IgG2b, κ
Inmunógeno: CXCR5 humano (CD185)
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_394324
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados El anticuerpo anti-CXCR5 humano de rata purificado (CD185) se puede utilizar para la tinción inmunofluorescente y los análisis de citometría de flujo de leucocitos humanos y líneas celulares que expresan CXCR5 (ver Figura). Se recomienda un procedimiento de tinción de varios pasos para amplificar las señales inmunofluorescentes para el análisis de citometría de flujo de la expresión de CXCR5 humano: Paso 1: Incubar 10e6 células con 0,06 - 0,5 mg de anticuerpo anti-CXCR5 humano de rata purificado (CD185) a 4 °C durante 15 - 20 minutos. Lavar las células dos veces con medio de tinción que contenga azida sódica (p. ej., PBS de Dulbecco o medio de cultivo tisular [sin rojo fenol ni biotina] con 0,09 % de azida sódica y 2 % de FCS inactivado por calor o 0,2 % de BSA). Paso 2: Incubar las células con IgG2b de ratón anti-rata con biotina (n.° de cat. 553898) a 4 °C durante 20 minutos. Lavar las células dos veces. Paso 3: Incubar las células con ≤ 0,06 mg de estreptavidina-ficoeritrina (n.° de cat. 554061) a 4 °C durante 20 minutos. Lavar dos veces. Resuspender las células en el medio de tinción y analizar las células teñidas mediante citometría de flujo, utilizando los controles de especificidad y compensación adecuados.
Avisos del producto: Avisos del producto. Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. La azida sódica es un inhibidor reversible del metabolismo oxidativo; por lo tanto, las preparaciones de anticuerpos que contienen este agente conservante no deben utilizarse en cultivos celulares ni inyectarse en animales. La azida sódica puede eliminarse lavando las células teñidas o el anticuerpo unido a la placa, o dializando el anticuerpo soluble en un tampón sin azida sódica. Dado que la endotoxina también puede afectar los resultados de los estudios funcionales, recomendamos el formato de anticuerpo NA/LE (sin azida/bajo endotoxina), si está disponible, para uso in vitro e in vivo. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.