BD, 552174, BD Pharmingen™ Biotina de rata anti-CCR7 humano (CD197)

Nombre alternativo: CCR7, BLR-2, EBI-1, CMKBR7
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG2a de rata, κ
Inmunógeno: proteína CCR7 humana
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Vol. por prueba: 20 µl
ID de registro: AB_394352
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene BSA y ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con biotina en condiciones óptimas y se eliminó la biotina no reaccionada.
Procedimientos de ensayo recomendados: El anticuerpo 3D12 biotinilado se puede utilizar con un reactivo de segundo paso muy brillante, como estreptavidina-ficoeritrina (n.º de cat. 554061) para la tinción inmunofluorescente y los análisis de citometría de flujo de leucocitos humanos y líneas celulares que expresan CCR7 (véase la figura). No podemos generar resultados reproducibles utilizando reactivos menos brillantes como estreptavidina-FITC o -PerCP con este anticuerpo. No se recomienda el uso de estreptavidina-FITC o -PerCP. Recomendación: Se sabe que los receptores de quimiocinas se internalizan durante la manipulación, lo que resulta en una expresión de baja frecuencia. Los estudios de inmunofenotipado de los receptores de quimiocinas deben realizarse en sangre completa recién extraída (<24 h). La incubación con el anticuerpo debe realizarse en la oscuridad. Se ha demostrado que la manipulación celular, como la separación con Ficoll, la congelación o la exposición a bajas temperaturas antes de la tinción, causa una disminución en la intensidad de la tinción y resultados inconsistentes. Se recomienda encarecidamente un procedimiento de tinción de varios pasos para amplificar las señales inmunofluorescentes en el análisis por citometría de flujo de la expresión de CCR7 humano. Se recomienda el anticuerpo anti-CD197 humano (CCR7) de rata purificado (n.° de cat. 552175) y un procedimiento de tinción de tres pasos para detectar la expresión de baja frecuencia.
Avisos del producto: Avisos del producto Este reactivo ha sido prediluido para su uso al volumen recomendado por prueba. Normalmente usamos 1 × 10^6 células en una muestra experimental de 100 µl (una prueba). Se debe usar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. La fuente de todas las proteínas séricas proviene de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en los Estados Unidos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para obtener protocolos técnicos.