BD, 552536, BD Pharmingen™ Biotina de ratón anti-CD120a humano

Nombre alternativo: Receptor de TNF tipo I; TNFR1; TNFR55; TNFR60; TNFRSF1A
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: Ratón BALB/c IgG2a, κ
Inmunógeno: proteína recombinante humana CD120a
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente), detección ELISA (probada durante el desarrollo)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_393945
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con biotina en condiciones óptimas y se eliminó la biotina no reaccionada.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: Biotin Mouse Anti-Human CD120a (Cat. No. 550900) se puede utilizar para tinción inmunofluorescente (≤ 1 µg anticuerpo/10×6 células) y análisis de citometría de flujo de células humanas nucleadas para medir sus niveles expresados ​​de TNFRI de superficie. Se recomienda un protocolo de tinción de dos capas para maximizar la detección de TNFRI expresado por células como se detalla en la leyenda de la figura. Como demostración de especificidad, la unión de MABTNFR1-B1 a TNFRI se inhibe cuando las células diana TNFRI+ humanas se preincuban con niveles de saturación de TNF humano recombinante a 4°C, es decir, cuando los TNFRI se unen con ligando. Según nuestros datos, un nivel de TNF humano recombinante superior a 50 ng/10×6 células es suficiente para inhibir por completo la unión de MABTNFR1-B1 (0,06 µg/10×6 células). Tenga en cuenta también que, como consecuencia de la activación in vivo o in vitro, el TNFRI de la superficie celular puede ser liberado por las células o expresado transitoriamente a niveles más altos. Como resultado, la activación celular puede afectar el nivel general expresado de TNFRI de superficie de la célula. Detección ELISA: El anticuerpo anti-CD120a humano de ratón con biotina sirve como anticuerpo de detección en un ELISA tipo sándwich para medir los niveles de proteína TNFRI soluble humana. El anticuerpo anti-CD120a humano de ratón con biotina se puede emparejar con el anti-CD120a humano de ratón purificado (n.º de cat. 552535) utilizando el TNFRI soluble humano recombinante como estándar. Este anticuerpo de detección debe titularse entre 0,5 y 1 µg/ml para determinar su concentración óptima para la detección ELISA. Para obtener curvas estándar lineales, se recomienda incluir en cada placa ELISA diluciones dobles de TNFRI humano soluble recombinante de 200 a 15 pg/ml. Para consultar la metodología específica, visite la sección de protocolos en "ELISA y ELISPOT" de nuestro sitio web: http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Consulte http://regdocs.bd.com para acceder a las fichas de datos de seguridad (FDS). Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.