BD, 552932, matriz de perlas citométricas BD™ (CBA) estándar liofilizado de citocinas inflamatorias humanas

Preparación y almacenamiento: Conservar el estándar liofilizado a 4 °C antes de su reconstitución. Las lioesferas de un vial del estándar de citocinas inflamatorias humanas, al reconstituirse en 2,0 mL de diluyente de ensayo, presentan una actividad de CBA similar a la de la interleucina (IL)-8, IL-1β, IL-6, IL-10, factor de necrosis tumoral (TNF) e IL-12p70 humanas, a una concentración de 5000 pg/mL. Tras la reconstitución, mantener el estándar de citocinas inflamatorias humanas a 4 °C y utilizar en un plazo de 12 horas. Cualquier estándar reconstituido no utilizado debe desecharse después de este período (no almacenar ni reutilizar).
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados El estándar de citocina inflamatoria humana se ha probado con el kit de citocina inflamatoria humana BD™ CBA (n.º de cat. 551811) para asegurar las cantidades de proteína y la función en el ensayo BD™ CBA. Se recomienda a los investigadores que consulten el manual del kit CBA o las instrucciones abreviadas a continuación (Protocolo de preparación del estándar de citocina inflamatoria humana). El estándar de citocina inflamatoria humana debe reconstituirse utilizando el diluyente de ensayo suministrado con los kits CBA mencionados anteriormente (n.º de componente 51-2432KC) o puede adquirirse por separado (n.º de cat. 560104). Preparación del estándar de citocina inflamatoria humana: El estándar de citocina inflamatoria humana está liofilizado y debe reconstituirse y diluirse en serie antes de mezclarlo con las perlas de captura de CBA y los reactivos de detección de PE. 1. Abra un vial del estándar liofilizado de citocinas inflamatorias humanas. Transfiera todas las liosferas a un tubo de polipropileno (BD Falcon™, n.° de cat. 352097). Etiquete el tubo como "Estándar superior". 2. Reconstituya el estándar con 2,0 ml de diluyente de ensayo. Deje que el estándar reconstituido se equilibre durante al menos 15 minutos antes de realizar las diluciones. Mezcle la proteína reconstituida únicamente con una pipeta. No agite en vórtex ni mezcle vigorosamente. 3. Etiquete 12 tubos adicionales de 75 mm (BD Falcon™, n.° de cat. 352008) y colóquelos en el siguiente orden: Estándar superior, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64, 1:128 y 1:256. 4. Añada 300 µl de diluyente de ensayo a cada tubo de dilución. 5. Realice una dilución seriada transfiriendo 300 µl del estándar superior al tubo de dilución 1:2 y mezcle bien. No mezcle con vórtex; mezcle solo con la pipeta. Continúe realizando diluciones seriadas transfiriendo 300 µl del tubo 1:2 al tubo 1:4 y así sucesivamente al tubo 1:256, y mezcle bien. Prepare un tubo con solo diluyente de ensayo para que sirva como control negativo de 0 pg/mL.
Avisos del producto: ProClin es una marca registrada de Rohm and Haas Company. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Advertencia: El estándar liofilizado CBA contiene 0,02 % (p/p) y el reactivo de detección (Parte A) contiene 0,002 % (p/p) de una mezcla CMIT/MIT (3:1), que consiste en: 5-cloro-2-metil-4-isotiazolin-3-ona [CE n.° 247-500-7] y 2-metil-4-isotiazolin-3-ona [CE n.° 220-239-6] (3:1). Indicación de peligro: Puede provocar una reacción alérgica en la piel. Consejos de precaución: No se debe permitir que la ropa de trabajo contaminada salga del lugar de trabajo. Use guantes/protección ocular/facial. Use ropa de protección. Evite respirar la niebla, los vapores o el aerosol. En caso de irritación o sarpullido en la piel: Consulte a un médico. EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con abundante agua. Quítese la ropa contaminada y lávela antes de volver a usarla. Deseche el contenido o el recipiente de acuerdo con la normativa local, regional, nacional e internacional.