BD, 553655, BD Pharmingen™ Antirratón purificado NA/LE para hámster CD154

Nombre alternativo: Ligando CD40; CD40L; gp39; Ly-62; Tnfsf5; T-BAM; HIGM1; IMD3
Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: Hámster Armenio IgG3, κ
Inmunógeno: clon Th1 de ratón activado D1.6
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente), bloqueo, inmunohistoquímica (reportada)
Concentración: 1,0 mg/ml
ID de registro: AB_394975
Tampón de almacenamiento: Sin azida/bajo endotoxina: Solución acuosa tamponada sin conservantes, filtrada estérilmente a 0,2 µm. El nivel de endotoxina es ≤0,01 UE/µg (≤0,001 ng/µg) de proteína, según lo determinado por el ensayo LAL.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Citometría de flujo: Para la detección de CD154 de ratón en células T periféricas activadas, se recomienda encarecidamente que las células T se purifiquen antes de la activación. El CD154 de ratón se expresa transitoriamente en las superficies de las células T normales activadas y ciertos clones de células T con un nivel máximo detectado 6-8 horas después de la activación. La activación con mAb anti-CD3e inmovilizado (p. ej., 145-2C11, n.º de cat. 557306/553058, o 500A2, n.º de cat. 553238) es suficiente para inducir la expresión de CD154 en células CD4+. Se ha informado que las células CD8+ expresan CD154 solo en respuesta al tratamiento con PMA/ionomicina. Por lo tanto, para la detección de CD154, es crucial utilizar los estímulos de activación adecuados y teñir las células en el momento óptimo para la expresión de CD154. Recomendamos el uso de un cóctel de IgG anti-hámster de ratón biotinilado (n.° de cat. 554010) seguido de un reactivo de segundo paso "brillante", como estreptavidina-PE (n.° de cat. 554061), para una detección óptima de CD154.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Aunque los isotipos de inmunoglobulina de hámster no están bien definidos, BD Biosciences Pharmingen ha agrupado los anticuerpos monoclonales IgG de hámster armenio y sirio según su reactividad con un panel de mAb IgG de ratón antihámster. Puede consultar la tabla de los grupos de IgG de hámster, Reactividad de los mAb Ig de ratón antihámster, en http://www.bdbiosciences.com/documents/hamster_chart_11x17.pdf. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.