BD, 553656, BD Pharmingen™ Antirratón purificado para hámster CD154

Nombre alternativo: Ligando CD40; CD40L; gp39; Ly-62; Tnfsf5; T-BAM; HIGM1; IMD3
Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: Hámster Armenio IgG3, κ
Inmunógeno: clon Th1 de ratón activado D1.6
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente), bloqueo, inmunohistoquímica congelada (reportada)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_394976
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. Conservar sin diluir a 4 °C.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Para la detección de CD154 de ratón en células T periféricas activadas, se recomienda encarecidamente que las células T se purifiquen antes de la activación. El CD154 de ratón se expresa transitoriamente en las superficies de las células T normales activadas y ciertos clones de células T con un nivel máximo detectado 6-8 horas después de la activación. La activación con mAb anti-CD3e inmovilizado (p. ej., 145-2C11, n.º de cat. 557306/553058, o 500A2, n.º de cat. 553238) es suficiente para inducir la expresión de CD154 en células CD4+. Se ha informado que las células CD8+ expresan CD154 solo en respuesta al tratamiento con PMA/ionomicina. Por lo tanto, para la detección de CD154, es crucial utilizar los estímulos de activación adecuados y teñir las células en el momento óptimo para la expresión de CD154. Recomendamos el uso de un cóctel de IgG anti-hámster de ratón biotinilado (n.° de cat. 554010) seguido de un reactivo de segundo paso "brillante", como estreptavidina-PE (n.° de cat. 554061), para una detección óptima de CD154.
Avisos del producto: Avisos del producto Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Aunque los isotipos de inmunoglobulina de hámster no se han definido bien, BD Biosciences Pharmingen ha agrupado los anticuerpos monoclonales IgG de hámster armenio y sirio según su reactividad con un panel de mAb de IgG anti-hámster de ratón. Puede consultar una tabla de los grupos de IgG de hámster, Reactividad de mAb de Ig anti-hámster de ratón, en http://www.bdbiosciences.com/documents/hamster_chart_11x17.pdf. La azida sódica es un inhibidor reversible del metabolismo oxidativo; Por lo tanto, las preparaciones de anticuerpos que contienen este conservante no deben utilizarse en cultivos celulares ni inyectarse en animales. La azida sódica puede eliminarse lavando las células teñidas o el anticuerpo unido a la placa, o dializando el anticuerpo soluble en un tampón sin azida sódica. Dado que la endotoxina también puede afectar los resultados de los estudios funcionales, recomendamos el formato de anticuerpos NA/LE (sin azida/bajo en endotoxina), si está disponible, para uso in vitro e in vivo.