BD, 554383, BD Pharmingen™ PE Rata Anti-Ratón IL-3

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: IL-3 recombinante de ratón
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395358
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis por citometría de flujo: El anticuerpo MP2-8F8 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis por citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-3 en poblaciones celulares mixtas. El anticuerpo MP2-8F8 conjugado con PE (n.º de cat. 554383) es especialmente adecuado para estos estudios (véase la figura, panel izquierdo). Para una tinción inmunofluorescente óptima con análisis por citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,25 µg de mAb/millón de células). Para conocer la metodología específica, consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en nuestro sitio web: www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo MP2-8F8 conjugado con un exceso molar de ligando (p. ej., IL-3 recombinante de ratón; n.º de cat. 554579) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con anticuerpo MP2-8F8 no marcado (n.º de cat. 554380, 554381) antes de la tinción. La técnica de tinción y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón o humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es PE-R3-34 (n.º de cat. 554685); úselo en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,25 µg mAb/1 millón de células). Neutralización: El anticuerpo NA/LE™ MP2-8F8 (n.° de cat. 554379) es útil para neutralizar la bioactividad de la IL-3 de ratón. Captura ELISA: El anticuerpo purificado MP2-8F8 (n.° de cat. 554380) es útil como anticuerpo de captura para un ELISA sándwich para medir los niveles de proteína IL-3 de ratón. Para obtener información sobre la metodología específica, consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre ELISA en el Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en nuestro sitio web: www.bdbiosciences.com. Para analizar la IL-3 de ratón en fluidos biológicos complejos como suero o plasma, se recomienda nuestro kit de ELISA sándwich OptEIA™ específico para IL-3 de ratón (n.° de cat. 555228).
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.