BD, 554387, BD Pharmingen™ Anti-IL-4 de rata purificada

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG2b de rata
Inmunógeno: IL-4 recombinante de ratón
Aplicación: Captura ELISA, citometría de flujo/bloqueo intracelular (probada rutinariamente), neutralización (probada durante el desarrollo), Western blot (reportado)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_398544
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. Conservar sin diluir a 4 °C.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados 1. Control de bloqueo para tinción intracelular: El anticuerpo BVD4-1D11 purificado (n.º de cat. 554386) puede usarse como control de bloqueo para demostrar la especificidad de la tinción de IL-4 mediante BVD4-1D11 conjugado y el anticuerpo. Para realizar este control, las células fijadas/permeabilizadas (aproximadamente 1 millón) pueden incubarse con 1-10 µg de anticuerpo BVD4-1D11 sin marcar (n.º de cat. 554386) durante 20 minutos a 4 °C, antes de teñirlas con el anticuerpo BVD4-1D11 conjugado (p. ej., 0,1-0,5 µg de mAb/1 millón de células). La técnica de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Para conocer la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria. 2. Captura ELISA: El anticuerpo purificado BVD4-1D11 (n.º de cat. 554387) es útil como anticuerpo de captura para una prueba ELISA tipo sándwich para medir los niveles de proteína IL-4 de ratón en sobrenadantes de cultivo tisular. Este anticuerpo puede combinarse con el anticuerpo biotinilado BVD6-24G2 (n.º de cat. 554390) y la IL-4 recombinante de ratón (n.º de cat. 550067) como estándar. Para detectar IL-4 en suero o plasma, se recomienda el kit ELISA BD OptEIA™ para IL-4 de ratón (n.º de cat. 555232). Nota: Se ha descubierto que el anticuerpo BVD4-1D11 purificado produce un fondo más alto en ELISA que el anticuerpo de captura de IL-4 de ratón alternativo, clon 11B11 (n.º de cat. 554434). Para superar este fondo alto, se recomiendan los siguientes procedimientos específicos para el clon BVD4-1D11: 1) Titular el anticuerpo de captura BVD4-1D11 (1-4 µg/ml) frente al anticuerpo de detección BVD6-24G2 biotinilado (0,1-1,0 µg/ml; es decir, una concentración inferior a la habitual del anticuerpo de detección). Se deben utilizar blancos separados para cada concentración de anticuerpo de detección biotinilado utilizado. 2) Utilizar el doble de la cantidad de lavados recomendados en todos los pasos del protocolo ELISA. 3. Neutralización: El anticuerpo NA/LE™ BVD4-1D11 (n.º de cat. 554385) es útil para la neutralización de la bioactividad de IL-4 de ratón. 4. WB: Se ha informado que el anticuerpo BVD4-1D11 es útil para la inmunotransferencia. Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.