BD, 554406, BD Pharmingen™ PE Rata Anti-Ratón GM-CSF

Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG2a de rata
Inmunógeno: GM-CSF recombinante de ratón
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente), captura ELISA (probada durante el desarrollo)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395371
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo MP1-22E9 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de GM-CSF en poblaciones celulares mixtas. El anticuerpo MP1-22E9 conjugado con PE (n.° de cat. 554406) es especialmente adecuado para estos experimentos (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente y un análisis de citometría de flujo óptimos, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤0,5 µg de mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en nuestro sitio web: www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo PE-MP1-22E9 con ligando (p. ej., GM-CSF de ratón, n.º de cat. 554586) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo MP1-22E9 no marcado (n.º de cat. 554404) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Una inmunoglobulina de control de isotipo IgG2a de rata adecuada para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es el anticuerpo PE-R35-95 (n.º de cat. 554689); Uso en concentraciones comparables al anticuerpo de interés. Captura ELISA: El anticuerpo purificado MP1-22E9 (n.º de cat. 554404) es útil como anticuerpo de captura para una prueba ELISA tipo sándwich para medir los niveles de proteína GM-CSF de ratón. El anticuerpo purificado MP1-22E9 puede combinarse con el anticuerpo biotinilado MP1-31G6 (n.º de cat. 554407) como anticuerpo de detección, con GM-CSF de ratón recombinante (n.º de cat. 554586) como estándar. Neutralización: El anticuerpo NA/LE™ MP1-22E9 (n.º de cat. 554403) es útil para neutralizar la bioactividad del GM-CSF de ratón. Un control de isotipo IgG2a de rata NA/LE™ adecuado para el anticuerpo MP1-22E9 es el anticuerpo R35-95 (n.º de cat. 554687).
Avisos del producto: Avisos del producto. Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. El uso de estos productos para medir los antígenos de activación expresados ​​en subconjuntos de células mononucleares con el fin de monitorear el estado inmunorregulador puede estar sujeto a una o más reivindicaciones de las siguientes patentes: Patentes de EE. UU. n.° 5.445.939, 5.656.446 y 5.843.689; Patente europea n.° 319.543; Patente canadiense n.° 1.296.622; Patente australiana n.° 615.880; y Patente japonesa n.° 2.769.156. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés.