BD, 554443, BD Pharmingen™ PE Anti-Ratón/Rata MCP-1 para hámster

Reactividad: Ratón, Rata (Prueba de control de calidad)
Isotipo: Hámster Armenio IgG1, κ
Inmunógeno: MCP-1 de ratón expresado en CHO purificado con heparina
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395394
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente: El anticuerpo 2H5 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis citométrico de flujo para identificar y enumerar células productoras de MCP-1 en poblaciones celulares mixtas. Para una tinción inmunofluorescente óptima para el análisis citométrico de flujo, se debe titular el anticuerpo anticitocina (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, consulte las secciones de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en nuestro sitio web: www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo 2H5 conjugado con un ligando (p. ej., MCP-1 de ratón recombinante; Cat. N.º 554590 para ratón o MCP-1 de rata recombinante; Cat. N.º 555110 para rata) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con anticuerpo 2H5 no marcado (Cat. N.º 554441) antes de la tinción. La técnica de tinción y los controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo IgG de hámster adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón fijadas/permeabilizadas es PE-G235-2356 (Cat. N.º 554711); usar en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg mAb/1 millón de células). ELISA: El anticuerpo 2H5 purificado (n.° de cat. 554441) puede utilizarse como anticuerpo de captura en un ELISA tipo sándwich para medir los niveles de MCP-1 de ratón, junto con el anticuerpo de ratón 4E2/MCP biotinilado (n.° de cat. 554444) como anticuerpo de detección y MCP-1 de ratón recombinante (n.° de cat. 554590) como estándar. Neutralización: El anticuerpo NA/LE™ 2H5 es útil para neutralizar la bioactividad de MCP-1 de ratón.
Avisos del producto: Avisos del producto Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos. Para conocer los espectros de fluorocromo y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Aunque los isotipos de inmunoglobulina de hámster no se han definido bien, BD Biosciences Pharmingen ha agrupado los anticuerpos monoclonales IgG de hámster armenio y sirio según su reactividad con un panel de mAb de IgG anti-hámster de ratón. Puede consultar una tabla de los grupos de IgG de hámster, Reactividad de los mAb de Ig anti-hámster de ratón, en http://www.bdbiosciences.com/documents/hamster_chart_11x17.pdf. Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos.