BD, 554462, BD Pharmingen™ PE Rata Antirratón CD126

Nombre alternativo: Il6ra; cadena α del receptor de IL-6; IL-6RA; IL-6R alfa
Reactividad: Ratón (Prueba de control de calidad)
Isotipo: IgG2b de rata, κ
Inmunógeno: células de hibridoma OKT4
Aplicación: Citometría de flujo (probada rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
Número de taller: ninguno
ID de registro: AB_395408
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados El anticuerpo D7715A7 conjugado con PE se puede utilizar para la tinción inmunofluorescente y los análisis citométricos de flujo de leucocitos de sangre periférica de ratón y líneas celulares que expresan receptores de IL-6. 1. Para ayudar a bloquear la tinción no específica debido a los receptores Fc, preincubar ~1 millón de células con 1 µg del anticuerpo anti-CD32/CD16 (anti-receptor FcγII/III) purificado (clon 2.4G2, Fc Block™, N.º de cat. 553142/553143) durante 30 minutos a 4 °C. 2. Incubar las células con 0,12 - 2,0 µg de anticuerpo D7715A7 conjugado con PE (N.º de cat. 554462) a 4 °C durante 45 minutos. Lave las células tres veces con un medio de tinción que contenga azida sódica (p. ej., PBS de Dulbecco o medio de cultivo tisular [sin rojo fenol] con 0,09 % de azida sódica y 1 % de FCS inactivado por calor). Recomendamos a los investigadores titular el anticuerpo D7715A7 hasta niveles de saturación para un rendimiento óptimo, minimizando así el riesgo de tinción débil. 3. Resuspenda las células en el medio de tinción y analice mediante citometría de flujo utilizando los controles de especificidad y compensación adecuados. Con este método, se observó tinción positiva con la línea celular B9, pero no con la línea de mastocitos MC/9 de ratón ni con la línea de linfocitos T CD4+ C20.4.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web sobre citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés.