BD, 554489, BD Pharmingen™ PE Anti-IL-5 humana para ratas

Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG2a de rata
Inmunógeno: IL-5 humana recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395427
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo JES1-39D10 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células humanas productoras de IL-5 en poblaciones celulares mixtas. El anticuerpo JES1-39D10 conjugado con PE (n.º de cat. 554489) es especialmente adecuado para estos experimentos (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente y un análisis de citometría de flujo óptimos, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para obtener información sobre la metodología específica, consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria, ambos disponibles en nuestro sitio web: www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo PE-JES1-39D10 con exceso de ligando (IL-5 humana, Cat. No. 554606) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina con el anticuerpo JES1-39D10 no marcado (Cat. No. 554488) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe. Una inmunoglobulina de control de isotipo IgG2a de rata adecuada para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas o de ratón fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es el anticuerpo PE-R35-95 (Cat. No. 554689); usar en concentraciones comparables al anticuerpo de interés. Captura ELISA: El anticuerpo purificado JES1-39D10 (n.º de cat. 554488) es útil como anticuerpo de captura para una prueba ELISA tipo sándwich para medir los niveles de proteína IL-5 humana. WB: El anticuerpo purificado JES1-39D10 (n.º de cat. 554487) ha demostrado ser útil para la inmunotransferencia (Western blotting). Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte los protocolos técnicos en www.bdbiosciences.com/us/s/resources. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de Citometría de Flujo Multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.