BD, 554507, BD Pharmingen™ PE Rata Anti-GM-CSF Humano

Nombre alternativo: CSF2; Factor estimulante de colonias 2 (granulocito-macrófago); CSF; GMCSF
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: LEW de rata, también conocido como Lewis IgG2a
Inmunógeno: GM-CSF humano recombinante
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,2 mg/ml
ID de registro: AB_395440
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la luz. No congelar. El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con R-PE en condiciones óptimas y se eliminaron el anticuerpo no conjugado y la PE libre.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo BVD2-21C11 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de GM-CSF en poblaciones celulares mixtas (véase la figura, panel izquierdo). Para una tinción inmunofluorescente óptima con el análisis de citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤0,5 µg mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, visite nuestro sitio web, http://www.bdbiosciences.com/us/s/resources, y vaya a la sección de protocolos, en "Citocinas (tinción intracelular)". Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo BVD2-21C11 conjugado con fluorocromo con ligando (p. ej., GM-CSF humano recombinante, n.º de cat. 550068) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo BVD2-21C11 no marcado (n.º de cat. 554503) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo IgG2a de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células de ratón o humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es la inmunoglobulina PE-R35-95 (n.º de cat. 554689); Usar en concentraciones comparables al anticuerpo de interés (p. ej., ≤0,5 µg mAb/1 millón de células). Detección ELISA: El anticuerpo BVD2-21C11 biotinilado (n.° de cat. 554505) es útil como anticuerpo de detección para una prueba ELISA tipo sándwich para medir los niveles de proteína GM-CSF humana. Para analizar GM-CSF en suero o plasma, se recomienda el kit ELISA OptEIA™ (n.° de cat. 555126). IP/WB: Se ha descrito la utilidad del anticuerpo BVD2-21C11 purificado para estudios de inmunoprecipitación y Western blot. Tenga en cuenta que esta aplicación no se analiza de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Se debe utilizar un control de isotipo a la misma concentración que el anticuerpo de interés. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Para obtener información sobre los espectros de fluorocromos y la configuración adecuada del instrumento, consulte nuestra página web de citometría de flujo multicolor en www.bdbiosciences.com/colors. Ficoll-Paque es una marca comercial de Amersham Biosciences Limited. Cy es una marca comercial de GE Healthcare. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para conocer los protocolos técnicos.