Product Description
Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de rata
Inmunógeno: proteína recombinante IL-6 humana
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_395468
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con FITC en condiciones óptimas y se eliminó el FITC no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Tinción inmunofluorescente y análisis de citometría de flujo: El anticuerpo MQ2-13A5 conjugado con PE es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis de citometría de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-6 en poblaciones celulares mixtas (véase la imagen). Para una tinción inmunofluorescente óptima para el análisis de citometría de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg de mAb/millón de células). Para consultar la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y consulte la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular del Manual de Función Inmunitaria. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo FITC-MQ2-13A5 con un exceso de ligando (p. ej., IL-6 humana recombinante; n.º de cat. 550071) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con el anticuerpo MQ2-13A5 no marcado (n.º de cat. 554543) antes de la tinción. Un control de isotipo de IgG1 de rata adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina es FITC-R3-34 (n.º de cat. 554684); utilizar en concentraciones comparables a las del anticuerpo de interés (p. ej., ≤ 0,5 µg de mAb/1 millón de células). OTRAS APLICACIONES Captura ELISA: El anticuerpo purificado MQ2-13A5 (Cat. No. 554543) es útil como anticuerpo de captura para un ELISA tipo sándwich para medir los niveles de proteína IL-6 humana. El anticuerpo purificado MQ2-13A5 puede combinarse con el anticuerpo biotinilado MQ2-39C3 (Cat. No. 554546) como anticuerpo detector, con la proteína IL-6 humana recombinante (Cat. No. 550071) como estándar. Para la metodología específica, visite nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com, y vaya a la sección de protocolos o al capítulo sobre ELISA en el Manual de Función Inmunitaria. Para analizar IL-6 en suero o plasma, se recomienda nuestro OptEIA™ Human IL-6 ELISA Set (Cat. No. 550799) o el OptEIA Human IL-6 ELISA Kit (Cat. No. 550799). Neutralización: La formulación sin azida/baja en endotoxinas del anticuerpo MQ2-13A5 (n.º de cat. 554541) es útil para la neutralización de la bioactividad de la IL-6 humana. Western blot: El anticuerpo MQ2-13A5 (n.º de cat. 554543) ha demostrado ser útil para Western blot. Tenga en cuenta que esta aplicación no se prueba de forma rutinaria en BD Biosciences Pharmingen.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías.
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