BD, 554574, BD Pharmingen™ FITC Anti-IL-12 humana de ratón (p40/p70)

Reactividad: Humana (Pruebas de control de calidad)
Isotipo: IgG1 de ratón
Inmunógeno: heterodímero p70 de IL-12 humana recombinante expresado en CHO
Aplicación: Tinción intracelular (citometría de flujo) (Probado rutinariamente)
Concentración: 0,5 mg/ml
ID de registro: AB_395486
Tampón de almacenamiento: Solución tamponada acuosa que contiene ≤0,09 % de azida sódica.
Estado regulatorio: RUO
Preparación y almacenamiento: El anticuerpo monoclonal se purificó a partir del sobrenadante de cultivo tisular o de la ascitis mediante cromatografía de afinidad. El anticuerpo se conjugó con FITC en condiciones óptimas y se eliminó el FITC no reaccionado. Conservar sin diluir a 4 °C y protegido de la exposición prolongada a la luz. No congelar.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Procedimiento de ensayo recomendado: Tinción inmunofluorescente y citometría de flujo. El anticuerpo C11.5 es útil para la tinción inmunofluorescente y el análisis citométrico de flujo para identificar y enumerar células productoras de IL-12 dentro de poblaciones celulares mixtas. Los anticuerpos C11.5 conjugados con FITC, PE o APC son especialmente adecuados para estos estudios (véase la figura). Para una tinción inmunofluorescente óptima con análisis citométrico de flujo, este anticuerpo anticitocina debe titularse (≤ 0,5 µg mAb/millón de células). Para una metodología específica, visite la sección de protocolos o el capítulo sobre tinción intracelular y citometría de flujo en el Manual de función inmunitaria, ambos publicados en nuestro sitio web, www.bdbiosciences.com. Un control útil para demostrar la especificidad de la tinción es uno de los siguientes: 1) prebloquear el anticuerpo C11.5 con ligando (p. ej., IL-12 p70 humana recombinante, n.º de cat. 554613 o IL 12 p40 humana recombinante, n.º de cat. 554633) antes de la tinción, o 2) prebloquear las células fijadas/permeabilizadas con anticuerpo C11.5 no marcado (n.º de cat. 554573) antes de la tinción. La técnica de tinción intracelular y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle en C. Prussin y D. Metcalfe. Un control de isotipo IgG1 de ratón adecuado para evaluar el nivel de tinción de fondo en células humanas fijadas con paraformaldehído/permeabilizadas con saponina son los controles de isotipo IgG1 de ratón, FITC-MOPC-21 (n.º de cat. 554679); utilizar el control a concentraciones comparables al anticuerpo de interés.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Precaución: La azida sódica produce ácido hidrazoico, altamente tóxico en condiciones ácidas. Diluya los compuestos de azida en agua corriente antes de desecharlos para evitar la acumulación de depósitos potencialmente explosivos en las tuberías. Ficoll-Paque es una marca registrada de Amersham Biosciences Limited.