BD, 554579, IL-3 recombinante de ratón BD Pharmingen™

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, la IL-3 recombinante de ratón (n.º de cat. 554579) debe alicuotarse en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5-10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina sérica humana o bovina, alicuotarse y almacenarse a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 1-2 mg/ml. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5– 10 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede perderse la actividad. Este producto no debe diluirse a menos de 2 μg/ml para el almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a su toxicidad, altos niveles de endotoxinas o posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: La IL-3 de ratón recombinante (n.º de cat. 554579) puede ser útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína IL-3 de ratón mediante ELISA tipo sándwich con el anticuerpo purificado MP2-8F8 (n.º de cat. 554381) como anticuerpo de captura y MP2-43D11 biotinilado (n.º de cat. 554384) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se recomienda a los investigadores incluir diluciones dobles de IL-3 de ratón recombinante de 2000-15 pg/mL en cada placa ELISA. Para medir la IL-3 de ratón en suero o plasma, se recomienda encarecidamente a los investigadores utilizar el kit ELISA BD OptEIA™ para IL-3 de ratón (n.º de cat. 555228). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de Bioensayo no se prueba rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente que titulen este material e incluyan controles apropiados en los experimentos relevantes. Se ha informado previamente un rango de actividad de 0,5-5,0x10^9 unidades/mg, que abarca una ED50 = 2-20 pg/mL, utilizando células indicadoras NFS-60 para la proliferación, con una unidad definida como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima en la saturación de citocinas. Bloqueo: La IL-3 recombinante de ratón (Cat. No. 554579) puede ser útil como control de bloqueo para el análisis de citometría de flujo cuando se usa con el anticuerpo MP2-8F8 conjugado con PE (Cat. No. 554383). Se informa a los investigadores que la aplicación de bloqueo no se prueba rutinariamente para este material. Las técnicas de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.