BD, 554586, BD Pharmingen™ GM-CSF recombinante de ratón

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, el GM-CSF de ratón recombinante (n.º de cat. 554586) debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 a 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina humana o bovina, dividirse en alícuotas y almacenarse a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 0,5 a 1 mg/ml. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 a 10 mg/ml. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede perderse la actividad. Este producto no debe diluirse a menos de 5 μg/ml para el almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a la toxicidad, los altos niveles de endotoxina o la posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: El GM-CSF de ratón recombinante (n.º de cat. 554586) puede ser útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína GM-CSF de ratón mediante ELISA sándwich con el anticuerpo MP1-22E9 purificado (n.º de cat. 554404) como anticuerpo de captura y el anticuerpo MP1-31G6 biotinilado (n.º de cat. 554407) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, los investigadores pueden considerar el uso de diluciones dobles del estándar GM-CSF de ratón recombinante de 2000 a 15 pg/mL para incluir en cada placa ELISA. Para medir el GM-CSF de ratón en suero o plasma, se recomienda encarecidamente a los investigadores utilizar el kit ELISA BD OptEIA™ para GM-CSF de ratón (n.º de cat. 555167). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de Bioensayo no se prueba rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente que titulen este material e incluyan controles apropiados en los experimentos relevantes. Se ha informado previamente un rango de actividad de 0,25 - 5,0 x 10^9 unidades/mg, que abarca una ED50 = 2 - 35 pg/mL, utilizando MC/9 como células indicadoras para la proliferación, con una unidad definida como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima en la saturación de citocinas. Bloqueo: El GM-CSF de ratón recombinante (Cat. No. 554586) puede ser útil como control de bloqueo para el análisis de citometría de flujo cuando se utiliza con el anticuerpo MP1-22E9 conjugado con PE (Cat. No. 554406). Se informa a los investigadores que la aplicación de bloqueo no se prueba rutinariamente para este material. Las técnicas de tinción de citocinas intracelulares y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos.