BD, 554611, BD Pharmingen™ IL-10 humana recombinante

Preparación y almacenamiento: Conservar el producto a -80 °C antes de su uso o para el almacenamiento prolongado de soluciones madre. Descongelar y centrifugar rápidamente el producto antes de su uso. Evitar congelaciones y descongelaciones repetidas. Esta preparación no contiene conservantes, por lo que debe manipularse en condiciones asépticas.
Procedimientos de ensayo recomendados: Procedimientos de ensayo recomendados Tras la descongelación inicial, el producto debe dividirse en alícuotas en microtubos de polipropileno y congelarse a -80 °C para su uso futuro. Alternativamente, el producto puede diluirse en un tampón neutro estéril que contenga no menos de 0,5 - 10 mg/ml de proteína transportadora, como albúmina humana o bovina, alícuotas y almacenamiento a -80 °C. Para el uso en ensayos biológicos in vitro, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de ≥ 1 mg/mL. Para su uso como estándar de ELISA, se recomiendan concentraciones de proteína transportadora de 5 - 10 mg/mL. Si no se añade la proteína transportadora o no se almacena a las temperaturas indicadas, puede producirse una pérdida de actividad. El producto no debe diluirse a menos de 50 μg/mL para un almacenamiento a largo plazo. Las proteínas transportadoras deben analizarse previamente para detectar posibles efectos en el sistema experimental de cada investigador. Las proteínas transportadoras pueden tener una influencia no deseada en los resultados experimentales debido a la toxicidad, los altos niveles de endotoxinas o la posible actividad bloqueante. Estándar ELISA: La IL-10 humana recombinante (n.° de cat. 554611) es útil como estándar cuantitativo para medir los niveles de proteína IL-10 humana en un ELISA sándwich específico para IL-10 con IL-10 antihumana de rata purificada (n.° de cat. 554705) como anticuerpo de captura y biotina anti-IL-10 humana y viral (n.° de cat. 554499) como anticuerpo de detección. Para obtener curvas estándar lineales, se recomienda considerar el uso de diluciones dobles del estándar de IL-10 humana recombinante de 2000 a 15 pg/mL en cada placa ELISA. Para medir la IL-10 humana en suero o plasma, se recomienda encarecidamente a los investigadores utilizar el conjunto ELISA BD OptEIA™ Human IL-10 (n.º de cat. 555157) y el kit ELISA BD OptEIA™ Human IL-10 (n.º de cat. 550613). Bioensayo: Se informa a los investigadores que la aplicación de bioensayo no se prueba rutinariamente para este material y se les recomienda encarecidamente titularlo e incluir controles apropiados en los experimentos relevantes. Se ha informado previamente un rango de actividad de 0,5 a 3,3 x 10^7 unidades/mg, que abarca una DE50 de 0,3 a 2 ng/mL, utilizando MC/9 como células indicadoras de proliferación, con una unidad definida como la cantidad de material necesaria para estimular una respuesta semimáxima en la saturación de citocinas. Bloqueo: La IL-10 humana recombinante (n.° de cat. 554611) puede ser útil como control de bloqueo para el análisis de citometría de flujo cuando se utiliza con anticuerpos conjugados con fluorocromos, como JES3-9D7 conjugado con PE (n.° de cat. 554498). Se informa a los investigadores que la aplicación de bloqueo no se analiza rutinariamente para este material. Las técnicas de tinción intracelular de citocinas y el uso de controles de bloqueo se describen en detalle por C. Prussin y D. Metcalfe.
Avisos del producto: Dado que las aplicaciones varían, cada investigador debe titular el reactivo para obtener resultados óptimos. Todas las proteínas séricas provienen de mataderos inspeccionados por el USDA ubicados en Estados Unidos. Consulte www.bdbiosciences.com/us/s/resources para consultar los protocolos técnicos.